Plazmidna DNA, kot in vitro transkripcijska (IVT) predloga, je pomembna surovina za proizvodnjo mRNA. Visok izkoristek, visoko čiščenje in visoka izkoristek plazmidne DNA so glavni Cilj med razvojem plazmidnega procesa.
Yaohai Bio-Pharma ponuja rešitev na enem mestu za razvoj plazmidov, vključno z razvojem postopkov navzgor (fermentacija), na koncu (čiščenje), karakterizacijo in validacijo postopkov. Imamo bogate izkušnje z izboljšanjem izkoristka plazmida in njegovo izolacijo iz kompleksnih matrik z razvojem in optimizacijo postopkov fermentacije, čiščenja in odstranjevanja nečistoč.
Osnovni bioproces za proizvodnjo plazmidov vključuje: Escherichia coli (E. coli) fermentacija, žetev celic in alkalna liza, bistrenje, koncentracija, tristopenjski kromatografski postopek (zajem, vmesno čiščenje in poliranje) in koncentracija.
Podrobnosti o storitvi | Operacije enote | parametri |
E. coli Fermentacija |
Pretresite bučko | Sestava medijev, antibiotik, prostornina inokuluma, rastna temperatura itd. |
Fermentor (7 L) |
Antibiotik, prostornina inokuluma, temperatura rasti, pH, raztopljeni kisik (DO), način hranjenja (npr. serija s hranjenjem), medij za hranjenje, čas fermentacije itd. |
|
Žetev celic | Mikrofiltracija | Standardna E. coli postopek obiranja |
Celična liza | Resuspendiranje celic, alkalna liza, nevtralizacija | Alkalno razmerje, čas lize |
Pojasnilo | Filtracija | Surovo filtriranje, niz filtrov 20 µm in 5 µm (zaželeno) |
Koncentracija | Ultrafiltracija, tangencialna filtracija | Velikost por (ali NMWC), transmembranski tlak (TMP), pretok, razmerje med prostornino filtrata in površino membrane |
Tristopenjska kromatografija | Izključitvena kromatografija (SEC) ali gelska filtracijska kromatografija (GFC) | Dolžina in premer kolone, sestava pufra, prostornina vbrizga, sestava mobilne faze (adsorpcija in desorpcija), pH, hitrost pretoka, ravnovesje, vezava, izpiranje in pogoji eluiranja. |
Afinitetna kromatografija (AF) | ||
Anionska izmenjevalna kromatografija (AEX) | ||
Koncentracija | Ultrafiltracija, tangencialna filtracija | Velikost por (ali NMWC), transmembranski tlak (TMP), pretok, razmerje med prostornino filtrata in površino membrane |
Več rešitev za proces čiščenja bioloških zdravil |