Enzim Kunci untuk Produksi RNA Panjang
mRNA, sebagai jenis RNA berkode panjang, bekerja dengan aman dan efisien pada lebih banyak orang selama COVID-19. RNA pengkode panjang lainnya, seperti self-amplifying RNA (saRNA) dan sirkular mRNA (circRNA) juga menunjukkan efisiensi dalam studi pra-klinis dan klinis.
Produksi RNA pengkode panjang dalam skala besar bergantung pada transkripsi in vitro (IVT) melalui beberapa reaksi enzimatik. Langkah-langkah produksi RNA meliputi persiapan DNA template, sintesis IVT RNA, sirkulasi, penghilangan DNA, modifikasi RNA (capping dan tailing), dan pemurnian RNA.
Ada beberapa enzim kunci yang digunakan dalam produksi RNA pengkode panjang (misalnya, mRNA, saRNA, dan circRNA), termasuk restriksi endonuklease, T7 RNA polimerase (T7 RNAP), inhibitor RNase, pirofosfatase anorganik, DNase I, enzim capping vaksinia, dan RNase R.
|
Proses
|
Enzim
|
fungsi
|
|
Persiapan DNA templat
|
Endonuklease restriksi
|
Linearisasi DNA plasmid (pDNA) untuk menghindari pembuatan transkrip yang lebih panjang.
|
|
Sintesis RNA IVT
|
T7 RNA polimerase (T7 RNAP)
|
Mengikat promotor T7 dan menghasilkan transkrip RNA spesifik; Memainkan peran kunci selama reaksi IVT.
|
|
Inhibitor RNase, rekombinan
|
Menghambat aktivitas RNase selama reaksi IVT.
|
|
Pirofosfatase, Anorganik (iPPase)
|
Cegah pirofosfat selama reaksi IVT.
|
|
Penghapusan DNA
|
DNAse I
|
Hapus templat DNA.
|
|
Modifikasi RNA
|
Enzim pembatas vaksin
|
Tambahkan struktur Cap1 ke ujung 5′ IVT mRNA.
|
|
2'-O-Metiltransferas
|
|
pengayaan sirkRNA
|
RNase R
|
Cerna RNA linier dan perkaya RNA sirkular.
|
Yaohai Bio-Pharma Menawarkan Solusi CDMO Terpadu untuk Enzim
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
TIDAK
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
