Pentingnya Penyaringan Regangan
Penapisan inang yang cocok diperlukan untuk pengembangan CMC biologis, yang menentukan kualitas dan konsistensi produk dan proses manufaktur. Tujuan langsung dari skrining inang adalah untuk menyediakan calon bank sel primer (PCB), dengan tingkat ekspresi tinggi dan stabilitas tinggi baik dalam hal stabilitas lintasan dan stabilitas penyimpanan. Penyaringan host yang cocok diperlukan karena dua alasan utama:
- Pertama, memilih inang mikroba dengan tingkat ekspresi tinggi. Ada beberapa strain yang tersedia secara komersial, yang digunakan untuk mengekspresikan berbagai jenis protein, seperti protein beracun, protein larut, atau protein eukariotik.
- Kedua, menyaring inang dengan stabilitas genetik. Pengujian stabilitas genetik adalah poin penting sepanjang siklus hidup produksi. Disarankan agar stabilitas genetik yang tinggi diakui sebagai karakteristik kunci lain untuk strain yang sesuai.
Kata kunci: seleksi regangan mikroba, skrining regangan mikroba, skrining bakteri atau ragi dengan throughput tinggi, skrining regangan berproduksi tinggi, skrining regangan yang sangat stabil, skrining regangan yang stabil secara genetik Aplikasi: pengobatan manusia, pengobatan hewan, vaksin, biologi sintetik, molekul besar rekombinan biologis, reagen biologis
Layanan Pemeriksaan Strain dari Yaohai Bio-Pharma
Dengan memanfaatkan lebih dari 10 tahun pengalaman CDMO di bidang biologi mikroba, kami mendukung pengembangan dan pembuatan berbagai molekul besar, termasuk vaksin subunit rekombinan, partikel mirip virus (VLP), hormon (insulin, GLP-1, hormon pertumbuhan), sitokin ( Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), faktor pertumbuhan (EGF, FGF, NGF), nanobodi/Antibodi domain tunggal (sdAbs), enzim, dll.
Kami telah mengumpulkan banyak pengalaman dalam pemilihan berbagai jenis vektor plasmid, dan inang mikroba, termasuk Bakteri Escherichia coli (E.coli), dan ragi Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Kami dapat menemukan sistem ekspresi terbaik untuk biologi unik Anda.
Kami mengumpulkan berbagai inang mikroba dengan sumber yang jelas dan CoA standar, termasuk E.coli ekspresi dan ekspresi ragi.
Detail Layanan
Layanan
|
Detail Layanan
|
Batas Waktu/Hari Minimal
|
Deliverables
|
Konstruksi Regangan (E. coli)
|
Transformasi plasmid (multi-host)
|
5
|
COA dari host komersial Laporan konstruksi strain
|
verifikasi PCR
|
Pemurnian saring
|
Pelestarian ketegangan
|
Konstruksi Regangan (Ragi)
|
Persiapan sel ragi yang kompeten
|
10
|
Linearisasi plasmid
|
Transformasi elektro
|
Skrining Resistensi/Defisiensi Nutrisi
|
Pemurnian saring
|
Pelestarian ketegangan
|
Pemutaran Tuan Rumah yang Cocok
|
Ekstraksi DNA Plasmid atau Genom
|
15-20
|
Proses penyaringan inangCOA dari strain hasil rekayasa
|
Verifikasi PCR, pencernaan enzim restriksi
|
Urutan gen target
|
Pemutaran host berekspresi tinggi
|
Skrining inang dengan stabilitas genetik
|
Pelestarian ketegangan
|
Studi kasus
Inang yang cocok meningkatkan tingkat ekspresi protein sebesar 2.5 kali lipat.
Kami ditugaskan untuk mengembangkan produksi tinggi E. coli tekanan. Dan kami mencoba tiga jenis komersial E. coli inang, berdasarkan karakteristik protein target. Hal ini menunjukkan bahwa strain S1-1 dan S1-2 (Gambar A: Jalur 1,2) meningkatkan kadar protein hingga 3.5 kali lipat dibandingkan strain awal klien (Gambar A: Jalur 3).
Selain itu, strain S1-1 menunjukkan stabilitas genetik yang tinggi (Gambar B), dan diakui sebagai strain kandidat untuk perbankan sel primer (PCB).
Fitur Layanan Kami
Keahlian yang ditunjukkan dengan berbagai inang mikroba, misalnya, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P.pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; S. cerevisiae dan H.polimorfa.
Kami berpengalaman dengan E. coli sekresi periplasma, ekspresi tubuh larut dan inklusi, serta ekspresi intraseluler atau sekresi ragi. Kami tidak menambahkan antibiotik atau menambahkan antibiotik berdasarkan panduan peraturan.
Kami membangun platform penyaringan throughput tinggi untuk menyaring strain yang berproduksi tinggi dan stabil dari lebih dari seratus kandidat strain.
Dipastikan bahwa proses rekayasa dan penyaringan regangan dapat ditelusuri, di bawah Manajemen Data dan Catatan yang Baik.