Circular mRNA (circRNA) telah banyak digunakan dalam studi fungsi gen atau protein. Sementara itu, ia populer dalam pengembangan biologi profilaksis dan terapeutik, mirip dengan mRNA.
Yaohai Bio-Pharma telah mengembangkan serangkaian teknologi sintesis circRNA untuk menyediakan RNA berkualitas tinggi, seperti desain dan optimasi sekuens, transkripsi in vitro (IVT), sirkularisasi/siklisasi, pemurnian, dan enkapsulasi nanopartikel lipid (LNP). Semua produk dirilis di bawah standar kontrol kualitas (QC) yang ketat.
Dibandingkan dengan mRNA linier, RNA sirkular (circRNA) memiliki struktur yang lebih stabil dan merupakan hot spot utama dalam penelitian obat asam nukleat saat ini. Ini memiliki berbagai aplikasi di berbagai bidang, baik sebagai coding circRNA atau non-coding circRNA, termasuk vaksin profilaksis untuk penyakit menular, vaksin onkologi terapeutik, obat onkologi terapeutik, terapi penggantian protein, pengobatan regeneratif, terapi sel dan gen (CGT) , peran spons molekuler dan aptamer RNA.
Proses | Layanan Opsional | Detail Layanan | Periode Pengiriman (hari) |
Desain dan Optimasi Urutan CirRNA | Desain dan Optimasi Urutan Pengkodean | Optimasi Kodon CDS | 1 |
Desain dan Optimasi Urutan Non-Coding | Urutan Intron dan Ekson, Desain dan Optimasi Lengan Homolog dan Spacer | 1-2 | |
Persiapan Plasmid Melingkar | Sintesis Gen | Sintesis Gen (Pihak Ketiga) | 7-10 |
Amplifikasi Plasmid | Amplifikasi Plasmid | 2 | |
Ekstraksi Plasmid | |||
Persiapan Plasmid Linier | Linearisasi dan Pemurnian Plasmid | Linearisasi Plasmid | 1 |
Pemurnian DNA Linearisasi | |||
Transkripsi dan Siklisasi In Vitro | Transkripsi dan Siklisasi In Vitro | Reaksi Transkripsi dan Siklisasi In Vitro | 1-2 |
Pencernaan RNase R | |||
Optimasi-opsional | Komposisi Reaksi, Optimasi Waktu | 2-5 | |
Pemurnian sirkRNA | Metode Pemurnian Konvensional | Curah Hujan Litium Klorida | 1 |
Pemurnian Manik Magnetik | 1 | ||
Pemurnian circRNA Sangat Murni | Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Preparatif (HPLC) | 1-2 | |
Pertukaran Penyangga | Ultrafiltrasi | 1 | |
Liofilisasi sirkRNA | Pengisian Sampel | Pengisian | 2-3 |
Liofilisasi | Pra-pembekuan | ||
Pengeringan Primer (Sublimasi) | |||
Pengeringan Sekunder (Desorpsi) | |||
Enkapsulasi circRNA-LNP | Enkapsulasi LNP | Pretreatment Bahan dan Cairan | 2 |
Pencampuran Perangkat Mikrofluida | |||
Pertukaran Penyangga | Filtrasi Aliran Tangensial | 1 | |
Mensterilkan | Penyaringan | ||
Kontrol Kualitas DNA Plasmid | Konsentrasi/kemurnian | Spektrofotometri Ultraviolet (UV). | 1-2 |
Konformasi plasmid | Elektroforesis Gel Agarosa (AGE) | ||
Elektroforesis Kapiler (CE) -Opsional | |||
Identifikasi plasmid | Identifikasi Enzim Pembatasan / USIA | ||
Kontrol Kualitas circRNA | Konsentrasi/kemurnian | Spektrofotometri Ultraviolet (UV). | - |
Kemurnian | Elektroforesis Gel Agarosa (AGE)/E-Gel | 0.5 | |
HPLC-opsional | 1 | ||
Kontrol Kualitas circRNA-LNP | Efisiensi Enkapsulasi | Metode RiboGreen | 1 |
Ukuran partikel | Hamburan Cahaya Dinamis (DLS) | 1 | |
Indeks Polidispersitas | Hamburan Cahaya Dinamis (DLS) | 1 | |
Potensi Zeta | Hamburan Cahaya Dinamis (DLS) | 1 | |
Uji Potensi Berbasis Sel | Transfeksi Sel | Pelapisan sel, transfeksi sel | 4 |
Mendeteksi Protein Target | Pengamatan fluoresensi, Western Blot/ELISA | 1-3 |
Kami mentransfeksi peningkatan sirkRNA protein fluoresen hijau (eGFP circRNA), mCherry circRNA, luciferase circRNA ke dalam sel 293T, dan mendeteksi protein target melalui sinyal fluoresensi, luminescent atau warna, western blot (WB), uji imunosorben terkait-enzim (ELISA).
Uji Potensi Berbasis Sel dari Sampel circRNA oleh Yaohai Bio-Pharma