Dalam proses persiapan mRNA transkripsi in vitro (IVT), diperlukan DNA plasmid yang telah dilinierkan sebagai template transkripsi IVT dengan bantuan polimerase RNA T7. DNA plasmid berkualitas tinggi sangat penting untuk transkripsi in vitro.
Berdasarkan platform layanan persiapan plasmid yang matang, Yaohai Bio-Pharma dapat menawarkan layanan persiapan DNA plasmid yang telah dilinierkan dengan kepuretan dan standar tinggi untuk mencapai transkripsi IVT yang efisien.
Detail Layanan
| Proses |
Layanan Opsional |
Detail Layanan |
Periode Pengiriman (hari kerja) |
| Persiapan Plasmid Lingkaran |
Sintesis gen |
Sintesis Gen (Pihak Ketiga) |
7-10 |
| Amplifikasi Plasmid |
Amplifikasi Plasmid |
2 |
| Ekstraksi Plasmid |
| Persiapan Plasmid Linear |
Linearisasi dan purifikasi plasmid |
Linearisasi plasmid |
1 |
| Purifikasi DNA Linear |
| Kontrol kualitas DNA plasmid |
Konsentrasi keaslian |
Spektrofotometri Ultraviolet (UV) |
1-2 |
| Konformasi Plasmid |
Elektroforesis Gel Agarosa (AGE) |
| Elektroforesis Kapiler (CE)-Opsional |
| Identifikasi Plasmid |
Identifikasi enzim pembatas/ AGE |
Fitur Kami
Pemilihan fleksibel metode linearisasi
Optimisasi metode ekstraksi dan pemurnian DNA untuk mencapai tingkat pemulihan yang tinggi.
- Kontrol Kualitas yang ketat
Standar kontrol proses yang ketat, dengan tingkat konformasi superhelikal sampel plasmid untuk penelitian lebih dari 80%.
Layanan persiapan dan pengendalian kualitas plasmid dengan standar tinggi dan efisiensi tinggi untuk memenuhi kebutuhan eksperimen.
Studi Kasus
Mengambil produk mRNA_luciferase Yaohai Bio-Pharma sebagai contoh, sampel plasmid templat transkripsi (kualitas penelitian) memiliki rasio superhelikal lebih dari 90%, rasio linearisasi mendekati 100%, dan rasio transkripsi berikutnya hingga 1:200 (DNA plasmid linearisasi:mRNA).
MRNA_luciferase yang diperoleh melalui persiapan plasmid linearisasi sebagai templat ditransfeksi ke dalam sel 293T, dan aktivitas reaksi enzim-substrat dievaluasi 24 jam setelah transfeksi.
Sinyal aktivitas luciferase yang kuat dapat terdeteksi dengan jelas, yaitu protein luciferase diekspresikan secara efisien, menunjukkan bahwa kepurenan templat transkripsi dapat sepenuhnya memenuhi persyaratan untuk preparasi mRNA berkualitas tinggi.
Uji Rasio Plasmid Superkoil
Validasi Ekspresi mRNA Luciferase Secara In Vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
