Dasar enkapsulasi adalah desain dan pengembangan sistem pengiriman. Sistem pengiriman yang dirancang dengan baik memungkinkan molekul circRNA memasuki tubuh tanpa terdegradasi oleh enzim RNA dan kemudian secara efektif dikirim ke lokasi target, melintasi membran sel, dan dilepaskan secara intraseluler.
Nanopartikel lipid (LNP) adalah sistem pengiriman terbaik yang tersedia, dengan keunggulan dalam enkapsulasi, ekspresi in vivo, dan keamanan in vivo dibandingkan dengan sistem pengiriman lainnya. LNP dengan fragmen asam nukleat mudah tertelan ke dalam sel dan membentuk badan intraseluler. Begitu memasuki sel, lingkungan asam tubuh intraseluler memprotonasi dan memberi muatan positif pada kepala lipid terionisasi, sehingga menyatu dengan membran dalam tubuh intraseluler dan melepaskan asam nukleat target ke dalam sel untuk beraksi.
Layanan circRNA Yaohai Bio-Pharma terus meningkat dan dapat menyediakan layanan enkapsulasi circRNA-LNP untuk mengoptimalkan parameter proses penting yang relevan dan meningkatkan konsistensi dan reproduktifitas produksi obat circRNA.
Proses | Detail Layanan | Periode Pengiriman (Hari) | Deliverables |
enkapsulasi circRNA-LNP | Pretreatment bahan dan cairan | 2 | produk obat circRNA-LNP (DP) |
Pencampuran perangkat mikrofluida | |||
Filtrasi aliran tangensial | 1 | ||
Sterilisasi filtrasi | |||
kontrol kualitas circRNA-LNP | Efisiensi enkapsulasi | 1 | Laporan pengujian |
Ukuran partikel dan indeks polidispersitas | |||
Potensi Zeta |
Sintesis cepat, efisiensi penelitian dan pengembangan yang tinggi, dan solusi yang telah dioptimalkan;
Rasio enkapsulasi bisa mencapai lebih dari 90%;
Ukuran nanopartikel lipid dapat dikontrol dengan mengubah laju dan rasio injeksi cairan;
Produk circRNA-LNP divalidasi oleh ekspresi sel in vitro dan dapat mengekspresikan protein target secara efisien.
Sampel LNP-eGFP circRNA disiapkan dan dosis yang berbeda (1ug, 2ug, dan 4ug) langsung ditransfusikan ke dalam sel 293T untuk memverifikasi apakah mereka dapat mengekspresikan protein target. Setelah 48 jam transfeksi, sinyal fluoresen yang jelas dapat diamati, dan terdapat efek peningkatan dosis intensitas fluoresensi.
Lipo-circ_eGFP, terdiri dari liposom dan eGFP circRNA yang tidak terenkapsulasi diambil sebagai kontrol.