Produk yang diperoleh melalui siklus in vitro dan pengayaan RNase R memerlukan penghilangan lebih lanjut dari transkripsi in vitro (IVT), termasuk substrat yang tidak terpakai dalam reaksi siklisasi, produk sampingan reaksi, dan RNA yang retak.
Yaohai Bio-Pharma memiliki solusi pemurnian yang matang seperti metode pengendapan LiCl, pemurnian menggunakan bead magnetik, pemurnian yang dikembangkan sendiri, dan berbagai solusi pemurnian lainnya untuk secara efektif menghilangkan berbagai kontaminan dan menyiapkan circRNA dengan kepuretan tinggi.
Solusi pemurnian untuk jumlah kecil circRNA untuk transfeksi sel dan sebagai bagian dari eksperimen hewan.
Larutan pemurnian untuk jumlah kecil circRNA untuk transfeksi sel dan sebagai bagian dari eksperimen hewan.
Skenario aplikasi dengan kualitas lebih tinggi;
Proses pemurnian yang stabil dan dapat diskalakan untuk memenuhi persyaratan produksi GMP.
Proses | Layanan Opsional | Detail Layanan | Periode Pengiriman (hari) | Hasil Pekerjaan |
pemurnian circRNA | Solusi pemurnian konvensional | Pengendapan Klorida Litium | 1 | zat aktif obat circRNA |
Pemurnian Butiran Magnetik | ||||
Pemurnian circRNA yang Sangat Murni | Kromatografi cair berkinerja tinggi (HPLC) berskala preparatif | 1-2 | ||
Pertukaran buffer | Ultrafiltrasi | 1 | ||
pengendalian kualitas circRNA | Konsentrasi \/ memurnikan | Spektrofotometri Ultraviolet (UV) | 0.5 | Laporan uji |
Kekayaan | Elektroforesis Gel Agarosa (AGE)/E-Gel | |||
HPLC-opsional | 1 |
Skenario aplikasi dapat dicapai.
circRNA dengan kekotoran lebih dari 90%;
Melalui pengendalian ketat terhadap RNase dalam lingkungan eksperimen dan konsumsi, degradasi RNA secara efektif dicegah.
Yaohai Bio-Pharma telah menetapkan solusi pemurnian circRNA yang matang yang dapat secara efektif menghilangkan berbagai kotoran terkait proses.
Produk circular RNA yang dipurifikasi oleh solusi konvensional masih jelas bercampur dengan RNA yang terbelah dan intron.
Setelah solusi pemurnian yang dikembangkan oleh Yaohai Bio-Pharma, berbagai kontaminan RNA linear seperti RNA yang terbelah dan intron dapat berhasil dihilangkan.
validasi Ekspresi circRNA
Menggunakan liposom konvensional, circRNA eGFP yang telah dipurifikasi ditransfeksi ke dalam sel 293T, dan sinyal fluoresensi diamati setelah 24 jam dan terus ditingkatkan pada 48 jam. Sinyal fluoresensi masih dapat terdeteksi pada hari ke-7 dan hari ke-14 setelah transfeksi.