Produk yang diperoleh melalui siklisasi in vitro dan pengayaan RNase R memerlukan penghilangan lebih lanjut dari transkripsi in vitro (IVT), termasuk substrat yang tidak dikonsumsi dalam reaksi siklisasi, produk sampingan reaksi, dan RNA yang dipotong.
Yaohai Bio-Pharma memiliki presipitasi LiCl yang matang, pemurnian manik magnetik, pemurnian yang dikembangkan sendiri, dan beragam solusi pemurnian lainnya untuk secara efektif menghilangkan berbagai kotoran dan menyiapkan circRNA yang sangat murni.
Solusi pemurnian sejumlah kecil circRNA untuk transfeksi sel dan sebagai bagian dari percobaan pada hewan.
Solusi pemurnian sejumlah kecil circRNA untuk transfeksi sel dan sebagai bagian dari percobaan pada hewan.
Skenario aplikasi dengan kualitas lebih tinggi;
Proses pemurnian yang stabil dan terukur untuk memenuhi persyaratan produksi GMP.
Proses | Layanan Opsional | Detail Layanan | Periode Pengiriman (Hari) | Deliverables |
pemurnian sirkRNA | Solusi pemurnian konvensional | Pengendapan litium klorida | 1 | zat obat circRNA |
Pemurnian manik magnetik | ||||
Pemurnian circRNA yang sangat murni | Kromatografi cair kinerja tinggi preparatif (HPLC) | 1-2 | ||
Pertukaran penyangga | Ultrafiltrasi | 1 | ||
kontrol kualitas sirkRNA | Konsentrasi / pemurnian | Spektrofotometri ultraviolet (UV). | 0.5 | Laporan pengujian |
Kemurnian | Elektroforesis gel agarosa (AGE)/E-gel | |||
HPLC-opsional | 1 |
Skenario aplikasi dapat dicapai.
circRNA dengan kemurnian lebih dari 90%;
Melalui kontrol ketat terhadap RNases di lingkungan percobaan dan bahan habis pakai, degradasi RNA dapat dicegah secara efektif.
Yaohai Bio-Pharma telah menciptakan solusi pemurnian circRNA yang matang dan dapat secara efektif menghilangkan berbagai kotoran terkait proses.
Produk RNA sirkular yang dimurnikan dengan larutan konvensional jelas masih tercampur dengan RNA dan intron yang terpotong.
Setelah larutan pemurnian yang dikembangkan oleh Yaohai Bio-Pharma, berbagai pengotor RNA linier, seperti RNA terpotong dan intron, dapat berhasil dihilangkan.
Validasi Ekspresi circRNA
Menggunakan liposom konvensional, eGFP circRNA yang dimurnikan ditransfusikan ke dalam sel 293T, dan sinyal fluoresensi diamati setelah 24 jam dan terus ditingkatkan pada 48 jam. Sinyal fluoresensi masih dapat dideteksi pada hari ke 7 dan hari ke 14 setelah transfeksi.