DNA plasmid, sebagai in vitro Templat transkripsi (IVT), adalah bahan mentah penting untuk pembuatan mRNA. Hasil tinggi, kemurnian tinggi, dan pemulihan DNA plasmid yang tinggi adalah yang utama tujuan selama pengembangan proses plasmid.
Yaohai Bio-Pharma menyediakan solusi terpadu untuk pengembangan plasmid, termasuk pengembangan proses hulu (fermentasi), hilir (pemurnian), karakterisasi proses, dan validasi proses. Kami memiliki pengalaman luas dalam meningkatkan hasil plasmid dan mengisolasinya dari matriks kompleks dengan mengembangkan dan mengoptimalkan proses fermentasi, pemurnian, dan penghilangan kotoran.
Bioproses dasar untuk pembuatan plasmid meliputi: Escherichia coli (E.coli) fermentasi, pemanenan sel dan lisis basa, klarifikasi, konsentrasi, proses kromatografi tiga langkah (penangkapan, pemurnian antara, dan pemolesan), dan konsentrasi.
Detail Layanan | Operasi Satuan | Parameters |
E. coli fermentasi |
Labu Kocok | Komposisi media, antibiotik, volume inokulum, suhu pertumbuhan, dan lain-lain. |
fermentor (7 L) |
Antibiotik, volume inokulum, suhu pertumbuhan, pH, oksigen terlarut (DO), cara pemberian pakan (misalnya fed-batch), media pemberian pakan, waktu fermentasi, dan lain-lain. |
|
Panen sel | Mikrofiltrasi | Standar E. coli proses pemanenan |
Lisis sel | Resuspensi sel, lisis basa, netralisasi | Rasio alkali, waktu lisis |
Klarifikasi | Penyaringan | Filtrasi kasar, rangkaian filter 20 µm dan 5 µm (lebih disukai) |
Konsentrasi | Ultrafiltrasi, filtrasi aliran tangensial | Ukuran pori (atau NMWC), Tekanan transmembran (TMP), Fluks, rasio volume filtrat terhadap luas membran |
Kromatografi tiga langkah | Kromatografi eksklusi ukuran (SEC), atau kromatografi filtrasi gel (GFC) | Panjang dan diameter kolom, komposisi buffer, volume injeksi, komposisi fase gerak (adsorpsi dan desorpsi), pH, laju alir, keseimbangan, pengikatan, pencucian, dan kondisi elusi. |
Kromatografi afinitas (AF) | ||
Kromatografi penukar anion (AEX) | ||
Konsentrasi | Ultrafiltrasi, filtrasi aliran tangensial | Ukuran pori (atau NMWC), Tekanan transmembran (TMP), Fluks, rasio volume filtrat terhadap luas membran |
Lebih Banyak Solusi Proses Pemurnian Biologis |