Semua Kategori
ENEN
desain Sekuen mRNA

desain Sekuen mRNA

Halaman Utama >  IVT RNA  >  Sintesis RNA Kustom  >  Sintesis mRNA Kustom  >  desain Sekuen mRNA

IVT RNA

desain Sekuen mRNA

Menurut dogma sentral, RNA pengirim (mRNA) adalah jembatan untuk transmisi materi genetik dari DNA ke protein.

mRNA memainkan peran biologis dengan mengkodekan protein dalam tubuh, dan mRNA matang pada organisme eukariotik terdiri dari lima komponen: 5' Cap (struktur cap), 5' UTR (daerah non-kode), ORF (rangkaian baca terbuka), 3' UTR, dan 3' ekor polyA (ekor poliadilenat).

undefined

Detail Layanan
Proses Layanan Opsional Detail Layanan Periode Pengiriman (hari)
desain dan Optimasi Sekuen mRNA Desain dan optimasi deretan kode

Penjajaran urutan CDS

Optimisasi Kodon CDS

1
Desain dan optimasi urutan non-kode

desain dan optimasi barisan 5' UTR

desain dan optimasi barisan 3' UTR

desain dan optimasi barisan polyA

1-2
Opsi yang dapat disesuaikan
5' UTR/3' UTR
  • Urutan UTR Alam
  • Urutan UTR Mutan/Disain Ulang
3' Ekor PolyA
  • ekor 100A ~120A (disarankan)
  • Ekor polyA tersegmentasi
  • Ekor kustom lainnya
Strategi Umum untuk Desain Urutan mRNA
komponen mRNA Fungsi Biologis Strategi Optimasi
5’ Cap Melindungi mRNA dari degradasi oleh eksonukleasa dan berfungsi bersama dengan polyA tail di ujung 3', protein pengikat polyA, dan faktor inisiasi translasi untuk memulai translasi protein. Struktur Cap1 alami menghindari penerima pengenalan pola dan dengan demikian mengurangi respons kekebalan alami, yang dapat dicapai melalui penutupan koeskriptif satu langkah atau penutupan enzimatik dua langkah [lihat penutupan enzimatik mRNA dan penutupan koeskriptif untuk detail].
5' UTR 5' UTR dapat dikenali oleh ribosom, mengatur terjemahan mRNA dan memengaruhi stabilitas mRNA. Mengandung urutan Kozak tanpa struktur sekunder yang sangat stabil. UTR alami dari gen yang diekspresikan tinggi disukai untuk mRNA transkripsi in vitro (IVT) seperti α-globin dan β-globin.
CDS Wilayah penyandi protein dan urutan penyandi untuk antigen, antibodi, atau protein fungsional lainnya. Optimasi kodon meningkatkan tingkat translasi, dengan mencatat bahwa beberapa kodon non- optimal mungkin memainkan peran dalam pelipatan protein.
3' UTR Mengatur terjemahan mRNA dan stabilitasnya. UTR alami dari gen yang diekspresikan tinggi disukai untuk mRNA IVT seperti α-globin dan β-globin.
ekor polyA 3' Mengatur ekspresi protein dan melindungi struktur cap dari degradasi. Diperlukan panjang yang memadai (100-150 bp); pemasangan polyA tail pada plasmid templat transkripsi memastikan panjang polyA tail yang lebih terdefinisi.
Fitur Kami
  • Pemilihan sumber UTR yang bervariasi

Sumber UTR alami & dimodifikasi dengan tingkat ekspresi tinggi dari berbagai perpustakaan; strategi modifikasi UTR yang matang;

  • Tim optimisasi CDS terdepan

Berkolaborasi dengan tim algoritma AI profesional untuk menyelesaikan optimasi kodon.

  • Distribusi polyA tail yang merata

Menambahkan urutan polyA sesuai dengan templat DNA untuk mengontrol panjang mRNA dengan lebih presisi.

  • Kombinasi optimasi yang bervariasi

Capai ekspresi mRNA yang efisien dengan imunogenisitas rendah.

Studi Kasus

Desain Sekuen mRNA Pelapor Ganda: mRNA mCherry-eGFP

Layanan mRNA Yaohai Bio-Pharma terus ditingkatkan dengan desain dan optimasi sekuen tandem gen pelapor ganda, yang mencapai ko-ekspresi dua gen.

Menggunakan reagen transfeksi konvensional, sekuen tandem gen ganda mRNA mCherry-eGFP ditransfeksikan ke sel 293T, dan dua sinyal fluoresen mCherry (merah) dan protein fluoresen hijau ditingkatkan (eGFP) dideteksi dengan ekspresi simultan setelah 48 jam, dan grafik tumpukan disoroti dalam kuning.

图片

图片

Ekspresi mRNA mCherry-eGFP di sel 293T

Dapatkan Penawaran Gratis

Get in touch