mRNA telah banyak digunakan dalam studi tentang fungsi gen atau protein. Selain itu, umumnya digunakan dalam pengembangan biologis pencegahan dan terapeutik. Sebagai strategi sintesis umum untuk molekul RNA, transkripsi in vitro (IVT) memungkinkan kita mendapatkan transkrip kustom secara efisien.
Yaohai Bio-Pharma telah mengembangkan serangkaian teknologi sintesis mRNA untuk menyediakan RNA berkualitas tinggi, seperti desain dan optimasi urutan, IVT, pemurnian, liofilisasi, dan encapsulasi nanopartikel lemak (LNP). Semua produk dirilis berdasarkan standar kontrol kualitas (QC) yang ketat.
Dengan meletusnya pandemi COVID-19 pada tahun 2020, teknologi mRNA telah berkembang pesat, dan penelitian serta aplikasinya mendapatkan perkembangan yang belum pernah terjadi sebelumnya, termasuk vaksin pencegah untuk pencegahan penyakit menular, vaksin onkologi terapeutik dan obat-obatan, terapi tumor, terapi penggantian protein, obat regeneratif, dan terapi sel serta gen (CGT).
vaksin mRNA | terapi mRNA |
|
Proses | Layanan Opsional | Detail Layanan | Periode Pengiriman (hari kerja) | Hasil Kerja |
desain dan Optimasi Sekuen mRNA | Desain dan optimasi deretan kode | Desain deretan CDS dan optimasi kodon | 1-3 | Berkas sekuen |
Desain dan optimasi urutan non-kode | Desain dan optimasi UTR, urutan polyA | |||
Persiapan Plasmid Template Transkripsi | Persiapan plasmid rekombinan | Sintesis gen | 7-10 | |
Pengamplifikan dan ekstraksi plasmid | 4 | |||
Linearisasi dan purifikasi plasmid | ||||
transkripsi mRNA In Vitro | Penutupan ko-transkripsional (metode satu langkah) | Transkripsi in vitro (IVT) / Analog cap | 1-2 | N/A |
Modifikasi nukleotida (modifikasi UTP/CTP) | ||||
Penghilangan templat DNA (DNase I) | ||||
Penutup enzimatik (proses dua langkah) | IVT | 2-3 | ||
Modifikasi nukleotida (modifikasi UTP/CTP) | ||||
Penghilangan templat DNA (DNase I) | ||||
pembersihan mRNA (lithium chloride/kuah magnetik) | ||||
Penutupan Enzimatik | ||||
pemurnian mRNA | Sistem pemurnian konvensional | Pengendapan Klorida Litium | 1 | zat obat mRNA |
Pemurnian Butiran Magnetik | ||||
Skema pemurnian kolom kromatografi | Kombinasi dari beberapa metode kromatografi | 1-2 | ||
Pertukaran buffer | Ultrafiltrasi | 1 | ||
liofilisasi mRNA | Liofilisasi | Pra-pembekuan | 2-3 | serbuk liofilisasi mRNA |
Pengeringan utama (sublimasi) | ||||
Pengeringan sekunder (desorpsi) | ||||
enkapsulasi mRNA | Enkapsulasi LNP | Enkapsulasi LNP | 2-3 | mRNA-LNP Produk obat |
Peningkatan konsentrasi dan pertukaran buffer | ||||
analisis Kualitas mRNA | zat aktif obat mRNA / bubuk liofilisasi | Konsentrasi, kepurenan | 1 | Laporan uji |
Integritas, efisiensi penutupan, distribusi ekor polyA | 2-5 | |||
produk obat mRNA-LNP | Efisiensi encapsulasi | 1 | ||
Ukuran partikel dan distribusinya | ||||
Muatan permukaan | ||||
validasi Ekspresi mRNA | evaluasi sel 293T | Penanaman sel | 4 | |
Transfeksi sementara sel | ||||
Pengamatan sinyal fluoresensi | 1-3 | |||
Western blot (WB) / Asam imunoserik terikat enzim (ELISA) |
5' Cap |
▪ Tidak berpenutup ▪ Cap0, bersamaan bertutup ▪ Cap1, bersamaan bertutup ▪ Cap1, penutupan enzimatik |
5' UTR/3' UTR |
▪ Urutan UTR alami ▪ Urutan UTR mutan/Terinsinyur |
3' Ekor PolyA |
▪ Ekor 100A ~120A (direkomendasikan) ▪ Ekor polyA tersegmentasi ▪ Ekor kustom lainnya |
Nukleosida dimodifikasi |
▪ Bases tanpa modifikasi ▪ Pseudouridine (Ψ) ▪ N1-Methylpseudouridine (N1Ψ) ▪ 5-methylcytosine (m5C) ▪ 5-methyluridine (m5U) ▪ 5-methoxyuridine (5moU) ▪ 2-thiouridine (s2U) ▪ 2′-O-methyl-U ▪ Modifikasi lainnya |
Alur Layanan Terpadu
Menyediakan serangkaian layanan dari desain urutan awal hingga persiapan mRNA di bagian belakang, pengendalian kualitas, dan validasi ekspresi.
Desain dan Optimasi Urutan Teknologi Terdepan Internasional
Desain urutan mRNA profesional dan optimasi memfasilitasi ekspresi mRNA yang efisien.
Modifikasi Nukleotida Beragam
Secara efektif meningkatkan ekspresi mRNA dan mengurangi respons imun merugikan dari mRNA.
Platform Pemurnian yang Matang
Dengan menggabungkan metode pemurnian konvensional dan dirancang sendiri, sampel mRNA diperoleh dengan kebersihan tinggi.
Platform QC Lengkap
Mengkaya opsi QC untuk memenuhi persyaratan uji rutin, seperti konsentrasi, kepurenan A260/280, dan integritas, serta persyaratan pengendalian kualitas tinggi, seperti efisiensi penutupan/pembagian polyA.
Pengiriman cepat
MRNA kustom dapat dikirimkan dalam waktu 7 hari kecuali sintesis urutan dilakukan oleh pihak ketiga.