mRNA telah banyak digunakan dalam studi fungsi gen atau protein. Sementara itu, hal ini biasa terjadi dalam pengembangan biologi profilaksis dan terapeutik. Sebagai strategi sintesis umum untuk molekul RNA, transkripsi in vitro (IVT) memungkinkan kita memperoleh transkrip khusus secara efisien.
Yaohai Bio-Pharma telah mengembangkan serangkaian teknologi sintesis mRNA untuk menyediakan RNA berkualitas tinggi, seperti desain dan optimalisasi sekuens, IVT, pemurnian, liofilisasi, dan enkapsulasi nanopartikel lipid (LNP). Semua produk dirilis di bawah standar kontrol kualitas (QC) yang ketat.
Dengan merebaknya pandemi COVID-19 pada tahun 2020, teknologi mRNA telah mengalami kemajuan pesat, dan penelitian serta penerapan terkait telah mengalami perkembangan yang belum pernah terjadi sebelumnya, termasuk vaksin profilaksis untuk pencegahan penyakit menular, vaksin dan obat-obatan onkologi terapeutik, terapi tumor, protein. terapi penggantian, pengobatan regeneratif, dan terapi sel dan gen (CGT).
Vaksin mRNA | Terapi mRNA |
|
Proses | Layanan Opsional | Detail Layanan | Periode Pengiriman (hari kerja) | Disampaikan |
Desain dan Optimasi Urutan mRNA | Desain dan optimalisasi urutan pengkodean | Desain urutan CDS dan optimasi kodon | 1-3 | Berkas urutan |
Desain dan optimalisasi urutan non-coding | Desain dan optimalisasi UTR, rangkaian poliA | |||
Persiapan Plasmid Templat Transkripsi | Persiapan plasmid rekombinan | Sintesis gen | 7-10 | |
Amplifikasi dan ekstraksi plasmid | 4 | |||
Linearisasi dan pemurnian plasmid | ||||
Transkripsi mRNA In Vitro | Pembatasan kotranskripsional (metode satu langkah) | Transkripsi in vitro (IVT) / Cap analog | 1-2 | N / A |
Modifikasi nukleotida (modifikasi UTP/CTP) | ||||
Penghapusan templat DNA (DNase I) | ||||
Pembatasan enzimatik (proses dua langkah) | IVT | 2-3 | ||
Modifikasi nukleotida (modifikasi UTP/CTP) | ||||
Penghapusan templat DNA (DNase I) | ||||
pemurnian mRNA (litium klorida/manik magnetik) | ||||
Pembatasan enzimatik | ||||
Pemurnian mRNA | Skema pemurnian konvensional | Pengendapan litium klorida | 1 | zat obat mRNA |
Pemurnian manik magnetik | ||||
Skema pemurnian kolom kromatografi | Kombinasi beberapa metode kromatografi | 1-2 | ||
Pertukaran penyangga | Ultrafiltrasi | 1 | ||
Liofilisasi mRNA | Liofilisasi | Pra-pembekuan | 2-3 | bubuk terliofilisasi mRNA |
Pengeringan primer (sublimasi) | ||||
Pengeringan sekunder (desorpsi) | ||||
Enkapsulasi mRNA | Enkapsulasi LNP | Enkapsulasi LNP | 2-3 | produk obat mRNA-LNPD |
Konsentrasi dan pertukaran buffer | ||||
Analisis Kualitas mRNA | bahan obat mRNA/bubuk terliofilisasi | Konsentrasi, kemurnian | 1 | Laporan pengujian |
Integritas, efisiensi pembatasan, distribusi ekor poliA | 2-5 | |||
produk obat mRNA-LNP | Efisiensi enkapsulasi | 1 | ||
Ukuran dan distribusi partikel | ||||
Muatan permukaan | ||||
Validasi Ekspresi mRNA | Evaluasi sel 293T | Pelapisan sel | 4 | |
Transfeksi sel sementara | ||||
Pengamatan sinyal fluoresensi | 1-3 | |||
Western blot (WB)/ Uji imunosorben terkait-enzim (ELISA) |
5' Tutup |
▪ Tidak tertutup ▪ Cap0, ditutup bersama ▪ Cap1, ditutup bersama ▪ Cap1, pembatasan enzimatik |
5' UTR/3' UTR |
▪ Urutan UTR Alam ▪ Urutan UTR Mutan/Rekayasa |
3' Ekor PoliA |
▪ 100A ~120A Ekor (disarankan) ▪ Ekor poliA tersegmentasi ▪ Ekor Kustom lainnya |
Nukleosida yang dimodifikasi |
▪ Basis yang tidak dimodifikasi ▪ Pseudouridin (Ψ) ▪ N1-Metilpseudouridine (N1Ψ) ▪ 5-metilsitosin (m5C) ▪ 5-metiluridin (m5U) ▪ 5-metoksiuridin (5moU) ▪ 2-tiouridin (s2U) ▪ 2′-O-metil-U ▪ Modifikasi lainnya |
Alur Pelayanan Terintegrasi
Menyediakan serangkaian layanan mulai dari desain urutan front-end hingga persiapan mRNA back-end, kontrol kualitas, dan validasi ekspresi.
Desain dan Optimasi Urutan Mutakhir Internasional
Desain dan optimalisasi urutan mRNA profesional memfasilitasi ekspresi mRNA yang efisien.
Modifikasi Nukleotida yang Beragam
Secara efektif meningkatkan ekspresi mRNA dan mengurangi respon imun merugikan mRNA.
Platform Pemurnian yang Matang
Dengan menggabungkan metode pemurnian konvensional dan yang dirancang sendiri, sampel mRNA diperoleh dengan kemurnian tinggi
Platform QC Lengkap
Perkaya opsi QC untuk memenuhi persyaratan pengujian rutin, seperti konsentrasi, kemurnian dan integritas A260/280, serta persyaratan kontrol kualitas tinggi, seperti efisiensi pembatasan/distribusi poliA.
Pengiriman Cepat
MRNA yang disesuaikan dapat dikirim dalam waktu 7 hari kecuali untuk sintesis urutan yang dialihdayakan.