Analisis situs N-glikosilasi sangat penting untuk memahami fungsi glikan. Yaohai Bio-Pharma menggunakan Kromatografi Likuid-Spektrometri Massa (LC-MS) setelah pemutusan enzimatik untuk situs N-glikosilasi.
Kami telah terlibat dalam Karakterisasi Struktur Protein dari berbagai molekul besar, termasuk Vaksin Subunit Rekombinan, Nanobodies/VHHs/ Antibodi Domain Tunggal (sdAbs), Fragmen Antibodi, Hormon/Peptida, Sitokin, Faktor Pertumbuhan (GF), Enzim, Kolagen, dll.
Persyaratan Regulasi untuk Situs N-Glikosilasi
Menurut panduan ICH Q6B, “untuk glikoprotein, kandungan karbohidrat (gula netral, gula amino, dan asam sialat) ditentukan. Selain itu, struktur rantai karbohidrat, pola oligosakarida (profil antenar), dan situs glikosilasi dari rantai polipeptida dianalisis sejauh mungkin.
Metode Analitis
Analisis |
Metode |
Situs N-Glikosilasi |
Kromatografi Likuid-Spektrometri Massa (LC-MS) setelah pemotongan enzimatis |
Prosedur
1. Pencernaan enzim protein menggunakan trypsin atau protease lainnya
2. Pisahkan peptida gliko fragmen
3. Konfirmasi situs N-glikosilasi dengan LC-MS
4. Analisis data