Deamidasi rantai samping glutamin dan asparagin adalah modifikasi umum dalam hal pengaruh terhadap sifat biopharmase protein. Deamidasi dapat terjadi pada residu glutamin, tetapi biasanya dengan tingkat yang jauh lebih rendah. Tingkat deamidasi dipengaruhi oleh suhu, pH, struktur protein lokal, dan residu aminoasida flanking.
Yaohai BioPharma menawarkan layanan pengujian deamidasi asam amino, yang memungkinkan Anda mendeteksi deamidasi asam amino melalui Kromatografi Likuid-Spektrometri Massa (LC-MS).
Kami telah terlibat dalam Karakterisasi Struktur Protein berbagai molekul besar, termasuk Vaksin Subunit Rekombinan, Nanobodies/VHHs/ Antibodi Domain Tunggal (sdAbs), Fragmen Antibodi, Hormon/Peptida, Sitokin, Faktor Pertumbuhan (CF), Enzim, Kolagen, dll.
Persyaratan Regulasi untuk Deamidasi Asam Amino
Menurut pedoman ICH Q6B, bentuk deamidasi dapat dideteksi dan dikarakterisasi dengan metode analitis kromatografi, elektroforesis, dan/atau metode lain yang relevan.
Metode Analitis
Analisis |
Metode |
Deamidasi |
Kromatografi Likuid-Mass Spektrometri (LC-MS) |
Prosedur
misalnya, deamidasi aspartat
1. Pencernaan enzimatik
2. LC-MS di bawah kondisi Kromatografi Likuid Berkinerja Tinggi (HPLC)
3. Analisis data
Deamidasi asparagin terjadi melalui perantara suksinimida (Suc), yang rentan terhadap rasemisasi dan hidrolisis, menghasilkan empat isomer Asp, termasuk L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp, dan D-IsoAsp.
Secara teori, deamidasi Gln dapat menghasilkan empat isomer Glu yang sesuai melalui proses serupa dengan deamidasi Asn.
Spektrometri massa dengan resolusi tinggi dengan mudah mengidentifikasi perbedaan massa 1-Da antara peptida yang mengandung Asn/Gln dan konterpart deamidasi yang sesuai, Asp/Glu.