Teknologi yang Terlibat dalam Sintesis mRNA

Teknologi yang Terlibat dalam Sintesis mRNA Indonesia

Pengandaian

Sintesis In Vitro mRNA

Komponen utama mRNA adalah 5'-cap, 5'-UTR, open reading frame (ORF), 5'-UTR, dan 5' poly A tail, yang penting untuk menjaga fungsi mRNA. Para peneliti telah menggunakan berbagai metode untuk mengidentifikasi dan mengoptimalkan urutan dan struktur mRNA.

Sintesis mRNA dilakukan berdasarkan transkrip in vitro (IVT) menggunakan templat DNA linier, RNA polimerase (T3, T7, atau SP6), nukleotida yang tidak dimodifikasi atau dimodifikasi, enzim, dan reagen yang sesuai.

Modifikasi Tutup 5'

Urutan mRNA matang dari eukariosit menunjukkan tutup 7-metilguanosin (m7G) di ujung 5', yang meningkatkan stabilitas mRNA dan efisiensi translasi. Ada dua metode umum untuk menangkap mRNA secara in vitro. Pertama, mRNA dapat dibatasi bersama dengan transkrip in vitro dengan menambahkan analog penutup struktur m7GpppG (misalnya CleanCap) ke sistem IVT. Metode pembatasan kotranskripsional ini memberikan struktur kapsul 5' alami dan meningkatkan efisiensi pembatasan hingga hampir 90-99%. Kedua, pemetaan mRNA juga dapat dilakukan dengan memetakan reaksi enzim setelah reaksi transkripsi in vitro.

Modifikasi PoliA

Ekor poli(A) juga memperpanjang waktu paruh mRNA in vivo dan meningkatkan efisiensi translasi mRNA. Panjang ekor poli(A) yang diperkuat harus 100-300 nukleotida. Selain itu, adenosin yang dimodifikasi meningkatkan stabilitas ekor poli A terhadap degradasi RNase seluler. Ekor Poli A dapat disisipkan melalui transkripsi in vitro menggunakan cetakan DNA yang mengkode poli A, sehingga menghasilkan panjang rangkaian poli A yang spesifik. Polimerase poli A rekombinan juga dapat digunakan melalui poliadenilasi enzimatik setelah transkripsi mRNA.

Modifikasi Nukleotida

Nukleosida yang dimodifikasi dapat menghambat pengenalan dan/atau aktivasi reseptor pengenalan pola (PRR) dan meningkatkan kemanjuran vaksin mRNA dalam dua cara yang sangat berbeda. penambahan nukleosida tertentu yang dimodifikasi secara kimia termasuk pseudouridine (ψ), 1-methylpseudouridine (m1ψ), thiouridine (s4U) dan 5-methylcytosine (m5C) dapat mencegah aktivasi TLR7/8 dan reseptor imun bawaan lainnya, yang secara signifikan mengurangi imunogenisitas. dari mRNA.

Sistem Pengiriman mRNA

Untuk mempertahankan fungsi mRNA, ia perlu memasuki sitoplasma inang dan mengekspresikan antigen spesifik. Salah satu tantangan tersulit yang dihadapi vaksin dan terapi mRNA terletak pada pengiriman mRNA ke dalam sel target dengan tingkat translasi yang cukup tinggi karena memerlukan sistem pengiriman mRNA yang sangat spesifik dan efisien. Beberapa vektor pengiriman mRNA telah dikembangkan dan digunakan, termasuk sel dendritik (DC), protamin, polimer kationik, dan liposom kationik.

Kompleks lipid kationik dengan mRNA dan sediaan lainnya secara kolektif dapat membentuk nanopartikel berukuran 80-200 nm yang disebut nanopartikel lipid (LNPs). Sebagai salah satu sistem pengiriman mRNA tercanggih, LNP mencakup lipid kationik yang dapat terionisasi, fosfolipid alami, kolesterol, dan polietilen glikol (PEG). Beberapa vaksin dan terapi RNA (siRNA dan mRNA) yang disetujui oleh Badan Pengawas Obat dan Makanan AS didasarkan pada sistem pengiriman LNP.

Yaohai Bio-Pharma Menawarkan Solusi Terpadu untuk RNA

Katalog Produk RNA

Katalog Produk mRNA
Katalog Produk saRNA
Katalog Produk circRNA

Sintesis RNA Kustom

Sintesis mRNA khusus
Sintesis saRNA khusus
Sintesis circRNA khusus

Layanan CDMO mRNA

Pengembangan proses
Manufaktur GMP
Pengisian dan Selesai Aseptik
Analisis dan Pengujian

Kiriman Khusus

Kelas	Deliverables	Spesifikasi	Aplikasi
non-GMP	Zat Obat, mRNA	0.1~10 mg (mRNA)	Penelitian praklinis seperti transfeksi sel, pengembangan metode analitik, studi pra-stabilitas, pengembangan formulasi
	Produk Obat, LNP-mRNA
GMP, Sterilitas	Zat Obat, mRNA	10mg~70 gram	Obat baru investigasi (IND), Otorisasi uji klinis (CTA), Pasokan uji klinis, Permohonan lisensi biologis (BLA), Pasokan komersial
	Produk Obat, LNP-mRNA	5000 botol atau jarum suntik/kartrid yang sudah diisi sebelumnya

semua Kategori

Teknologi yang Terlibat dalam Sintesis mRNA Indonesia

Pengandaian