Protease Penghapusan Tag
Untuk meningkatkan kelarutan dan menyederhanakan proses pemurnian protein rekombinan, peneliti biasanya menambahkan tag fusi, yang biasanya digunakan adalah tag His, protein pengikat maltosa (MBP), dan glutathione-S-transferase (GST).
Meskipun ditandai sebagai rangkaian protein tambahan, namun harus dihilangkan untuk menjaga aktivitas biologis dalam industri farmasi. Penghapusan tag fusi memerlukan protease spesifik lokasi, seperti enterokinase (EK), trombin, protease virus etsa tembakau (TEVp), protease rhinovirus manusia 3C (HRV3C), protease protein pengubah ubiquitin kecil (SUMO), virus bintik-bintik vena tembakau ( TVMV) protease, dan karboksipeptidase A/B (CPA/CPB).
Tipe
|
Enzim
|
Situs Pengakuan
|
Endoprotease penghapusan tag
|
Enterokinase (EK), Enteropeptidase
|
DDDDK↓
|
Thrombin
|
LVPR↓GS
|
protease TEV
|
ENLYFQ↓G
|
protease HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
protease SUMO
|
Struktur tersier SUMO
|
protease TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
Eksoprotease penghapusan tag
|
Karboksipeptidase A (BPA)
|
Asam amino terminal-C, kecuali Pro, Lys dan Arg
|
Karboksipeptidase B (CPB)
|
C-terminal Lys dan Arg
|
Protease Lainnya
Aplikasi
|
Enzim
|
fungsi
|
Protease lainnya
|
Protease K
|
Protease serin yang mencerna protein dengan menghidrolisis ikatan peptida.
|
IdeS, protease IgG
|
Enzim pendegradasi IgG (Ides) yang membelah di tempat spesifik imunoglobulin G (IgG), menghasilkan fragmen Fab dan Fc
|
protease IgA1
|
Enzim proteolitik yang memotong situs spesifik dalam rangkaian wilayah engsel imunoglobulin A1 (IgA1) manusia.
|
Nuklease
Aplikasi
|
Enzim
|
fungsi
|
Nuklease
|
Nuklease
|
Membelah asam nukleat (DNA atau RNA) dengan menghidrolisis ikatan fosfodiester.
|
Batasi enzim
|
Endonuklease yang membelah DNA pada atau dekat lokasi tertentu.
|
Amidase
Aplikasi
|
Enzim
|
fungsi
|
Amidase
|
PNGase F.Sejarah pertemuanPNGase F
|
Membelah antara residu GlcNAc dan asparagin terdalam dari oligosakarida manosa tinggi, hibrida, dan kompleks.
|
Yaohai Bio-Pharma Menawarkan Solusi CDMO Terpadu untuk Reagen Enzimatik