Značaj inženjeringa naprezanja
Inženjering sojeva ima za cilj učiniti ekspresiju domaćinom sa karakteristikama očekivanja, što je neophodno za razvoj CMC bioloških lijekova i određuje kvalitetu i dosljednost proizvoda i procesa proizvodnje.
Ključne riječi: genetski inženjering i skrining soja, konstrukcija soja za ekspresiju proteina, inženjering mikrobnih stanica, inženjering soja bakterija, inženjering soja kvasca, konstrukcija prokariotskog mikroorganizma, inženjering eukariotskog mikroorganizma, inženjering soja
Primjena: humana medicina, medicina za životinje, cjepivo, sintetička biologija, rekombinantni biološki lijekovi velikih molekula, biološki reagens
Usluge inženjeringa sojeva tvrtke Yaohai Bio-Pharma
Koristeći više od 10 godina iskustva CDMO-a u mikrobnim biološkim lijekovima, akumulirali smo bogato iskustvo u inženjeringu i odabiru različitih vrsta plazmidnih vektora i mikrobnih domaćina (bakterija, kvasac). Možemo pronaći najbolji sustav ekspresije za vaše jedinstvene biološke lijekove.
Prikupili smo razne mikrobne domaćine s jasnim izvorima i standardnim CoA-om, uključujući
bakterija: Escherichia coli (E. coli)
Kvasac: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Pojedinosti usluge
|
Usluge
|
Pojedinosti usluge
|
Minimalna vremenska linija/dan
|
isporučeno
|
|
Strain Engineering
|
Izbacivanje gena ili brisanje gena
|
TBD
|
Izvješće o inženjerstvu naprezanja
|
|
Gene knock-in, ili Gene insertion
|
|
Konstrukcija naprezanja (E. coli)
|
Transformacija plazmida (više domaćina)
|
5
|
COA komercijalnih hostova,
Izvješće o konstrukciji naprezanja
|
|
PCR verifikacija
|
|
Pročišćavanje soja
|
|
Očuvanje soja
|
|
Konstrukcija soja (kvasac)
|
Priprema kompetentnih stanica kvasca
|
10
|
|
Linearizacija plazmida
|
|
Elektro transformacija
|
|
Provjera otpornosti/nutritivnog nedostatka
|
|
Pročišćavanje soja
|
|
Očuvanje soja
|
|
Odgovarajući pregled domaćina
|
Ekstrakcija DNK plazmida ili genoma
|
15-20
|
Proces provjere domaćina,
Izvješće o ispitivanju modificiranih sojeva
|
|
PCR verifikacija, probava restrikcijskim enzimima
|
|
Sekvenciranje ciljnog gena
|
|
Probir domaćina visoke ekspresije
|
|
Probir domaćina s genetskom stabilnošću
|
|
Očuvanje soja
|
Studija slučaja
Projektirana Hansenula polymorpha poboljšala je prinos ekspresije HPV L1 VLP.
Uspostavili smo kvasac Hansenula polimorfna (H. polymorpha) inženjering i platforma za probir ekspresije rekombinantnih proteina/peptida. Prvo, generirali smo H. polimorfa sojevi s nedostatkom proteaze ciljanom delecijom gena. Drugo, vektor koji nosi HPV L1 gen transformiran je u kompetentan H. polimorfa ćelija. Konačno, odabiremo najbolji klon između stotina opcija, s genetski stabilnom i visokoproizvodnim svojstvima.
Naše značajke usluge
Pokazali smo stručnost u raznim mikrobnim domaćinima, npr. Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink soj 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) i Hansenula polimorfna (H. polymorpha).
Imamo iskustva s E. coli periplazmatična sekrecija, ekspresija topljivih i inkluzijskih tjelešaca, kao i intracelularna ekspresija ili ekspresija sekrecije kvasca.
Ne dodajemo antibiotike ili ih dodajemo prema regulatornim uputama.
Uspostavljamo platformu za probir visoke propusnosti za probir visokoproduktivnih i stabilnih sojeva od preko sto sojeva kandidata.
Osiguravamo da je proces inženjeringa soja i pregleda sljediv, pod dobrim upravljanjem podacima i zapisima.
HR
EN
AR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
