Određivanje molekularne težine pomoću LC-MS
Intaktna molekularna težina uvijek je bila prepoznata kao važna karakteristika bioloških lijekova. Analiza intaktne molekularne težine koristi se za demonstraciju proteinskih/peptidnih proizvoda i provjeru bioloških lijekova. Mjerenje molekularne težine zahtjev je regulatornih smjernica.
Yaohai Bio-Pharma nudi analizu netaknute molekularne težine pod prirodnim, reduciranim, N-deglikoziliranim uvjetima. Koristimo tekućinsku kromatografiju-masenu spektrometriju (LC-MS) za određivanje intaktne molekularne težine.
Regulatorni zahtjevi za molekularnu težinu
U ICH Q6 preporučuje se da se "molekularna težina (ili veličina) odredi kromatografijom za isključivanje veličine, elektroforezom u SDS-poliakrilamidnom gelu (u redukcijskim i nereducirajućim uvjetima), masenom spektrometrijom (MS) i drugim odgovarajućim tehnikama".
Analitičke metode
| Analiza |
Metode |
| Molekularna težina |
LC-MS / tekuća kromatografija/elektrosprejna masena spektrometrija (LC/ES-MS) nativnih, reduciranih, N-deglikoziliranih proteina ili podjedinica |
Analitički postupci
Intaktna molekularna težina:
- Izvođenje LC-MS na nativnom uzorku kakav je primljen.
- LC-MS Analiza podataka.
Smanjena molekularna težina:
- Obrada uzorka proteina prikladnim redukcijskim sredstvom;
- Izvođenje LC-MS na smanjenom proteinu;
- LC-MS Analiza podataka.
N-deglikozilirana molekularna težina:
- Uklanjanje N-glikana odgovarajućim enzimom;
- Izvođenje LC-MS na N-deglikoziliranom proteinu;
- LC-MS Analiza podataka.
Smanjena i N-deglikozilirana molekularna težina:
- Obrada uzorka proteina prikladnim redukcijskim sredstvom;
- Uklanjanje N-glikana odgovarajućim enzimom;
- Izvođenje LC -MS na reduciranom i N-deglikoziliranom proteinu;
- LC-MS Analiza podataka.
Molekulska težina podjedinice proteina:
- Cijepanje podjedinice
- Izvođenje LC-MS na proteinskoj podjedinici
- LC-MS analiza podataka
HR
EN
AR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
