Analiza mjesta N-glikozilacije ključna je za razumijevanje funkcija glikana. Yaohai Bio-Pharma koristi tekuću kromatografiju-masenu spektrometriju (LC-MS) nakon enzimskog cijepanja za mjesto N-glikozilacije.
Sudjelovali smo u strukturnoj karakterizaciji proteina raznih velikih molekula, uključujući rekombinantna podjedinična cjepiva, nanotijela/VHH/protutijela s jednom domenom (sdAbs), fragmente antitijela, hormone/peptide, citokine, faktore rasta (GF), enzime, kolagene, itd.
Regulatorni zahtjevi za mjesto N-glikozilacije
Prema smjernicama ICH Q6B, „za glikoproteine se određuje sadržaj ugljikohidrata (neutralni šećeri, amino šećeri i sialne kiseline). Nadalje, struktura ugljikohidratnih lanaca, oligosaharidni uzorak (profil antene) i mjesto(a) glikozilacije polipeptidnog lanca analiziraju se u najvećoj mogućoj mjeri.
Analitička metoda
Analiza |
Metode |
Mjesto N-glikozilacije |
Tekuća kromatografija-masena spektrometrija (LC-MS) nakon enzimskog cijepanja |
Procedure
1. Enzimska probava proteina pomoću tripsina ili druge proteaze
2. Odvojite fragmente glikopeptida
3. Potvrdite mjesto N-glikozilacije pomoću LC-MS
4. Analizirajte podatke