Značaj istraživanja štrama
Istraživanje odgovarajućih domaćina je nužno za razvoj CMC bioloških sredstava, što određuje kvalitet i konzistentnost proizvoda i procesa proizvodnje. Direktni cilj istraživanja domaćina je pružiti kandidata za početnu primarnu ćelijsku banku (PCB), sa visokim izraznim nivoima i visokom stabilnosti u smislu stabilnosti prolaza i stabilnosti čuvanja. Istraživanje odgovarajućeg domaćina je potrebno zbog dvaju glavnih razloga:
- Prvo, odabrati mikrobiološkog domaćina s visokim izraznim nivoom. Postoji više komercijalno dostupnih štrama koje se koriste za izraz različitih vrsta proteina, poput toksičnih proteina, rastvorljivih proteina ili eukariotskih proteina.
- Drugo, istražiti domaćina s genetskom stabilnošću. Testiranje genetske stabilnosti je ključna točka tijekom cijelog životnog ciklusa proizvodnje. Predlaže se da se visoka genetska stabilnost shvati kao još jedna ključna karakteristika odgovarajućeg štrama.
Ključne riječi: odabir mikrobiološke štede, presređivanje mikrobioloških šteda, visokoprinosno presređivanje bakterija ili kvasaca, presređivanje štede s visokim proizvodnjom, presređivanje vrlo stabilne štede, genetski stabilni odabir štede Primjena: liječenje ljudi, liječenje životinja, cjepivo, sintetička biologija, rekombinantni veliki molekuli bioloških lijekova, biološki reagens
Usluge za presređivanje šteda od Yaohai Bio-Pharma
Zahvaljujući više od deset godina iskustva u CDMO-u u području mikrobioloških bioloških tvari, podržavamo razvoj i proizvodnju raznih velikih molekula, uključujući rekombinantne subjedinična cjepiva, čestice slične virusu (VLP), hormone (insulin, GLP-1, hormon rasta), citochine (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), rastni faktori (EGF, FGF, NGF), nanotijela/Jednodomenska tijela (sdAbs), enzime itd.
Nakupili smo bogato iskustvo u odabiru različitih vrsta plazmidnih vektora i mikrobioloških domaćinstava, uključujući bakterije Escherichia coli (E. coli), i kvasina Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Možemo pronaći najbolji sistem izražavanja za vaše jedinstvene biološke sastojke.
Prikupili smo različite mikrobiološke nosače s jasnim izvorima i standardnom CoA, uključujući E.Coli izražavanje i kvasinsko izražavanje.
Detalji usluge
|
Usluge
|
Detalji usluge
|
Najmanja vremenska linija/dan
|
Isporučivi
|
|
Konstrukcija štraine (E. coli)
|
Transformacija plazmida (višestruki nosači)
|
5
|
COA komercijalnih nosača Izvještaj o konstrukciji štraine
|
|
Potvrda PCR
|
|
Čišćenje šteda
|
|
Čuvanje šteda
|
|
Konstrukcija šteda (kvasac)
|
Priprema kompetentnih kvasaćih stanica
|
10
|
|
Linearnizacija plazmida
|
|
Elektrotransformacija
|
|
Testiranje otpornosti\/nutricijske nedostatnosti
|
|
Čišćenje šteda
|
|
Čuvanje šteda
|
|
Testiranje prikladnog domaćina
|
Ekstrakcija plazmidne ili genomne DNK
|
15-20
|
Proces izbjegavanja domaćinaCOA inženjerskih štrijela
|
|
Potvrda PCR-om, digestija restrikcijskim enzimima
|
|
Sekvenciranje ciljne gene
|
|
Izbjegavanje domaćina s visokim izrazom
|
|
Izbjegavanje domaćina s genetskom stabilnosti
|
|
Čuvanje šteda
|
Studija slučaja
Odgovarajuća domaćina povećava razinu proteina za 2,5 puta.
Dobiveni su nam zadaci za razvoj visoko-proizvodnih E. coli štrijela. I probali smo tri vrste komercijalnih E. coli domaćina, na temelju karakteristika ciljnog proteina. Pokazano je da su štrijele S1-1 i S1-2 (Slika A: Redak 1,2) povećale razinu proteina na 3,5 puta više od početne štrijele klijenta (Slika A: Redak 3).
Također, štrijela S1-1 pokazala je visoku genetsku stabilnost (Slika B), te je prepoznata kao kandidat za primarno stvaranje stanica (PCB).
Naše karakteristike usluge
Potvrdjena stručnost s različitim mikrobiološkim domaćinima, npr. E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink štapa 1/2/3/4; S. cerevisiae i H. polymorpha .
Imamo iskustvo s E. coli ekspresijom u periplazmatičkom prostoru, rastvorljivom i ekspresijom inkluzijskih tijela, te sa ekspresijom unutar plijevaca ili sekretionom ekspresijom. Ne dodajemo antibiotike ili ih dodajemo prema uputama regulativnih tijela.
Stvaramo platformu za visokoprostorno testiranje kako bismo izbjegli odabir visoko produktivnih i stabilnih štapova među više od stotinu kandidata.
Osigurano je da je proces inženjerstva i presjekanje uzoraka praćiv, u skladu s Dobre upravljanje podacima i zapisima.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
