Određivanje molekularne težine putem LC-MS
Intaktna molekularna težina uvijek je bila priznata kao važna karakteristika bioloških lijekova. Analiza intaktne molekularne težine koristi se za demonstriranje proteinskih/proteidskih proizvoda i potvrdu bioloških lijekova. Mjerenje molekularne težine je zahtjev regulativnih smjernica.
Yaohai Bio-Pharma ponudi analizu intaktne molekularne težine u prirodnim, reduciranim i N-deglikoziranim uvjetima. Koristimo tekućinsku kromatografiju-masenosnu spektroskopiju (LC-MS) za određivanje intaktne molekularne težine.
Regulativni zahtjevi za molekularnu težinu
Preporučeno je u ICH Q6 da se „molekularna težina (ili veličina) određuje pomoću kromatografije izbjegavanja volumena, SDS-poliacrilamidne gel elektroforeze (u reduciranim i ne-reduciranim uvjetima), masnosne spektroskopije (MS) i drugih odgovarajućih tehnika“.
Analitičke metode
| Analiza |
Metode |
| Molekularna težina |
LC-MS / Tavanjska kromatografija/Elektrospraj masenspektrometrij (LC/ES-MS) prirodnih, smanjenih, N-deglekosiliranih proteina ili podjedinica |
Analitički postupci
Cijela molekularna težina:
- Izvođenje LC-MS-a na izvornom uzorku u prirodnom stanju.
- Analiza podataka LC-MS.
Smanjena molekularna težina:
- Tretiranje proteiničkog uzorka odgovarajućim smanjuvačem;
- Izvođenje LC-MS-a na smanjenom proteini;
- Analiza podataka LC-MS.
N-deglekosilirana molekularna težina:
- Uklanjanje N-glikanova pomoću odgovarajućeg enzima;
- Izvršavanje LC-MS na N-deglikoziranoj proteini;
- Analiza podataka LC-MS.
Umanjena i N-deglikozirana molekularna težina:
- Tretiranje proteiničkog uzorka odgovarajućim smanjuvačem;
- Uklanjanje N-glikanova pomoću odgovarajućeg enzima;
- Izvršavanje LC-MS-a na umanjenoj i N-deglikoziranoj proteini;
- Analiza podataka LC-MS.
Molekularna težina podjedinice proteina:
- Cjepanje podjedinice
- Izvršavanje LC-MS-a na podjedinici proteina
- Analiza podataka LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
