Deamidacija bočnih lanaca glutamina i asparagina je uobičajena modifikacija s obzirom na utjecaj na svojstva proteinskih biolikova. Deamidacija može se dogoditi i u reziduumima glutamina, ali obično uz mnogo nižu brzinu. Brzine deamidacije utječu temperature, pH, lokalna struktura proteina i okolni aminokiseline.
Yaohai BioPharma pruža uslugu testiranja deamidacije aminokiselina, koja vam omogućuje otkrivanje deamidacije aminokiselina pomoću tekuće kromatografije-masene spektrometrije (LC-MS).
Bili smo uključeni u karakterizaciju strukture proteina različitih velikih molekula, uključujući rekombinantne podjedinične cjepive, Nanotijele/VHHs/Jednodomene antigene (sdAbs), dijelove antigena, hormone/peptide, citochine, faktore rasta (CF), enzime, kolagene itd.
Uredbe o deamidaciji aminokiselina
Prema smjernicama ICH Q6B, deamidirane forme mogu se otkriti i karakterizirati pomoću kromatografskih, elektroforetskih i/ili drugih relevantnih analitičkih metoda.
Analitičke metode
| Analiza |
Metode |
| Deamidacija |
Tecajna Kromatografija-Masno Spektroskopija (LC-MS) |
Postupci
npr., deamidacija asparagina
1. Enzimatska digeracija
2. LC-MS u uvjetima Visoke Performanse Tecajne Kromatografije (HPLC)
3. Analiza podataka
Deamidacija asparagina odvija se putem suksinimidnog međuproizvoda (Suc), koji je osjetljiv na racemizaciju i hidrolizu, što daje četiri Asp izomera, uključujući L-Asp, L-IzoAsp, D-Asp i D-IzoAsp.
Teorijski, deamidacija glutamina bi mohla proizvesti četiri odgovarajuće Glu izomere kroz proces sličan deamidaciji Asn.
Visoko razlučiva masa spektrometrija lako identificira 1-Da maseni razlik između peptida s Asn/Gln i njihovih odgovarajućih deamidiranih protivnika s Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
