Molekulmassi määramine LC-MS abil
Tervet molekulmassi on alati peetud bioloogiliste ainete oluliseks omaduseks. Intaktse molekulmassi analüüsi kasutatakse valgu/peptiidi toodete demonstreerimiseks ja bioloogiliste ainete kontrollimiseks. Molekulimassi mõõtmine on regulatiivsete juhiste nõue.
Yaohai Bio-Pharma pakub terviklikku molekulmassi analüüsi natiivsetes, redutseeritud N-deglükosüülitud tingimustes. Intaktse molekulmassi määramiseks kasutame vedelikkromatograafia-massspektromeetriat (LC-MS).
Regulatiivsed nõuded molekulmassile
ICH Q6-s on soovitatav, et "molekulmassi (või suuruse) määramiseks kasutatakse suuruseralduskromatograafiat, SDS-polüakrüülamiidgeelelektroforeesi (redutseerivates ja mitteredutseerivates tingimustes), massispektromeetriat (MS) ja muid sobivaid tehnikaid".
Analüütilised meetodid
| Analüüs |
Meetodid |
| Molekulmass |
Natiivsete, redutseeritud N-deglükosüülitud valkude või subühikute LC-MS / vedelikkromatograafia/elektropihustus-massispektromeetria (LC/ES-MS) |
Analüütilised protseduurid
Intaktne molekulmass:
- LC-MS teostamine saadud algse prooviga.
- LC-MS Andmete analüüs.
Vähendatud molekulmass:
- Valguproovi töötlemine sobiva redutseeriva ainega;
- LC-MS teostamine redutseeritud valguga;
- LC-MS Andmete analüüs.
N-deglükosüülitud molekulmass:
- N-glükaanide eemaldamine sobiva ensüümiga;
- LC-MS läbiviimine N-deglükosüülitud valgule;
- LC-MS Andmete analüüs.
Vähendatud ja N-deglükosüülitud molekulmass:
- Valguproovi töötlemine sobiva redutseeriva ainega;
- N-glükaanide eemaldamine sobiva ensüümiga;
- LC-MS teostamine redutseeritud ja N-deglükosüülitud valguga;
- LC-MS Andmete analüüs.
Valgu allüksuse molekulmass:
- Allüksuse lõhustamine
- LC-MS teostamine valgu allüksusel
- LC-MS andmete analüüs
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
