N-glykaani profiilimine on oluline biofarmatoodete tootmiseks. Yaohai Bio-Pharma pakub N-glykaani profiilimise teenust vabastatud ja märgitud glykaanidega, kasutades Võsikaseme-Lõigmassspectromeetria (LC-MS) meetodit. N-glykaanide näidisvalmistamise üldised sammud hõlmavad glykopeptidi (GP) hävitamist, de-glykosüleerimist, puhastamist, märgistamist/derivatsiooniga ning Faasiextraktseerimist (SPE).
Oleme osalenud erinevates suurte molekulite proteiinistruktuuri karakteriseerimises, sealhulgas rekombinantsetes subüünivaktsiinides, nanokehades/VHHs/d ühe domeeni kehadest (sdAbs), antikehaosades, hormoonides/vedelikutest, sütokiinides, kasvuasjades (GF), enzyymides, kollageenides jne.
Reguleerivad nõuded N-glykaani profiilimise kohta
ICH Q6B juhendis öeldud, et "glykopeptide puhul määratakse karbohüdraatide sisaldus (neutraalsed suhkruusid, aminosuhkruused ja siialiinsuurused). Lisaks analüüsitakse karbohüdraatiketju struktuuri, oligosuhkruusi mustri (antennaprofiil) ning polüpeptiidikettide glykosüleerimiskoha võimaliku ulatuse piires.
Analüütiline meetod
| Analüüs |
Meetodid |
| N-glykaan profiil |
Vabastatud ja märgitud glikaanide vooluveekromaatoomass-spektromeetri (LC-MS) analüüs |
Menetlused
1. Enzyymiline glikaanide vabastamine Peptiid-N-Glykosidaas F-ga (PNGase F)
2. Vabastatud glikaanide derivatiivne tootmine 2-amiinibenzamiidiga (2-AB)
3. TSK Amide - 80 veeru abil kogutud N-glikaanide tühjendamine, kui on olemas suured hulgad detergeente, mittevooluvateid soole või materjale, mis sisaldavad vaba amiinirühmi
4. Märgistamine fluoresentses 2-amiinibenzamiidiga (2-AB)
5. Märgistatud N-glikaanide LC-MS analüüs
6. Andmeanalüüs
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
