mRNA er blevet brugt i vid udstrækning i studiet af gen- eller proteinfunktioner. I mellemtiden er det almindeligt i udviklingen af profylaktiske og terapeutiske biologiske lægemidler. Som en fælles syntesestrategi for RNA-molekyler gør in vitro-transkription (IVT) os i stand til at opnå tilpassede transkriptioner effektivt.
Yaohai Bio-Pharma har etableret et sæt mRNA-synteseteknologier for at levere RNA af høj kvalitet, såsom sekvensdesign og optimering, IVT, oprensning, lyofilisering og lipid nanopartikel (LNP) indkapsling. Alle produkter frigives under strenge kvalitetskontrolstandarder (QC).
Med udbruddet af COVID-19-pandemien i 2020 er mRNA-teknologien avanceret med stormskridt, og dens relaterede forskning og anvendelser har opnået hidtil uset udvikling, herunder profylaktiske vacciner til forebyggelse af infektionssygdomme, terapeutiske onkologiske vacciner og lægemidler, tumorterapi, protein erstatningsterapi, regenerativ medicin og celle- og genterapi (CGT).
mRNA-vaccine | mRNA Terapeutik |
|
Proces | Valgfri service | Service detaljer | Leveringsperiode (arbejdsdag) | leverance |
mRNA-sekvensdesign og -optimering | Design og optimering af kodningssekvenser | CDS-sekvensdesign og kodonoptimering | 1-3 | Sekvens fil |
Design og optimering af ikke-kodende sekvenser | Design og optimering af UTR, polyA sekvenser | |||
Transskriptionsskabelon Plasmidforberedelse | Rekombinant plasmidpræparat | Gensyntese | 7-10 | |
Plasmidamplifikation og ekstraktion | 4 | |||
Plasmid linearisering og oprensning | ||||
mRNA in vitro transkription | Co-transkriptionel dækning (et-trins metode) | In vitro transkription (IVT) / Cap analog | 1-2 | N / A |
Nukleotidmodifikationer (UTP/CTP-modifikationer) | ||||
Fjernelse af DNA-skabelon (DNase I) | ||||
Enzymatisk dækning (to-trins proces) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotidmodifikationer (UTP/CTP-modifikationer) | ||||
Fjernelse af DNA-skabelon (DNase I) | ||||
mRNA-oprensning (lithiumchlorid/magnetiske perler) | ||||
Enzymatisk afdækning | ||||
mRNA oprensning | Konventionel rensningsplan | Lithiumchloridudfældning | 1 | mRNA lægemiddelstof |
Magnetisk perlerensning | ||||
Kromatografisøjleoprensningsskema | Kombination af flere kromatografimetoder | 1-2 | ||
Bufferudveksling | Ultrafiltrering | 1 | ||
mRNA-lyofilisering | frysetørring | Forfrysning | 2-3 | mRNA frysetørret pulver |
Primær tørring (sublimering) | ||||
Sekundær tørring (desorption) | ||||
mRNA-indkapsling | LNP indkapsling | LNP indkapsling | 2-3 | mRNA-LNPDrug produkt |
Koncentration og bufferudveksling | ||||
mRNA kvalitetsanalyse | mRNA lægemiddelstof/ lyofiliseret pulver | Koncentration, renhed | 1 | Test rapport |
Integritet, dækningseffektivitet, polyA-halefordeling | 2-5 | |||
mRNA-LNP lægemiddelprodukt | Indkapslingseffektivitet | 1 | ||
Partikelstørrelse og fordeling | ||||
Overfladeladning | ||||
mRNA-ekspressionsvalidering | 293T celleevaluering | Celleplettering | 4 | |
Forbigående transfektion af celler | ||||
Fluorescenssignalobservation | 1-3 | |||
Western blot (WB)/Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) |
5' Cap | ▪ Uden dækning ▪ Cap0, co-capped ▪ Cap1, co-capped ▪ Cap1, enzymatisk capping |
5' UTR/3' UTR | ▪ Natur UTR-sekvens ▪ Mutant/Engineered UTR-sekvens |
3' PolyA hale | ▪ 100A ~120A hale (anbefales) ▪ Segmenteret polyA hale ▪ Andre brugerdefinerede haler |
Modificerede nukleosider | ▪ Uændrede baser ▪ Pseudouridin (Ψ) ▪ N1-Methylpseudouridin (N1Ψ) ▪ 5-methylcytosin (m5C) ▪ 5-methyluridin (m5U) ▪ 5-methoxyuridin (5moU) ▪ 2-thiouridin (s2U) ▪ 2'-O-methyl-U ▪ Andre ændringer |
Integreret serviceflow
Lever en række tjenester fra frontend-sekvensdesign til back-end-mRNA-forberedelse, kvalitetskontrol og ekspressionsvalidering.
International banebrydende sekvensdesign og optimering
Professionelt mRNA-sekvensdesign og -optimering letter effektiv mRNA-ekspression.
Diversificerede nukleotidmodifikationer
Øger effektivt mRNA-ekspression og reducerer mRNA-skadelige immunresponser.
Moden rensningsplatform
Ved at kombinere en konventionel og selvdesignet oprensningsmetode opnås mRNA-prøver med høj renhed
Komplet QC-platform
Berig QC-muligheder for at opfylde kravene til rutinetests, såsom koncentration, A260/280-renhed og integritet, samt høje kvalitetskontrolkrav, såsom dækningseffektivitet/polyA-fordeling.
Hurtig levering
Skræddersyet mRNA kan leveres på så hurtigt som 7 dage med undtagelse af outsourcet sekvenssyntese.