تحديد الوزن الجزيئي بواسطة LC-MS
لقد تم دائمًا التعرف على الوزن الجزيئي السليم باعتباره سمة مهمة للبيولوجيا. يتم استخدام تحليل الوزن الجزيئي السليم لإظهار منتجات البروتين/الببتيد والتحقق من المواد البيولوجية. يعد قياس وزن الجزيء أحد متطلبات المبادئ التوجيهية التنظيمية.
تقدم شركة Yaohai Bio-Pharma تحليلًا سليمًا للوزن الجزيئي في ظل ظروف أصلية ومخفضة ومتحللة من N-deglycosylated. نحن نستخدم التحليل اللوني السائل - قياس الطيف الكتلي (LC-MS) لتحديد الوزن الجزيئي السليم.
المتطلبات التنظيمية للوزن الجزيئي
يوصى في ICH Q6 بأن "يتم تحديد الوزن الجزيئي (أو الحجم) باستخدام كروماتوغرافيا استبعاد الحجم، والرحلان الكهربي للهلام بولي أكريلاميد SDS (في ظل ظروف مخفضة وغير مخفضة)، وقياس الطيف الكتلي (MS)، وغيرها من التقنيات المناسبة".
طرق تحليلية
| تحليل الأداء |
طرق |
| الوزن الجزيئي الغرامي |
LC-MS / تحليل كروماتوغرافي سائل / قياس الطيف الكتلي بالرش الكهربائي (LC/ES-MS) للبروتينات الأصلية أو المخفضة أو منزوعة الغليكوزيل N أو الوحدة الفرعية |
أجراءات تحليلية
الوزن الجزيئي السليم:
- تنفيذ LC-MS على العينة الأصلية كما وردت.
- تحليل بيانات LC-MS.
انخفاض الوزن الجزيئي:
- معالجة عينة البروتين بعامل اختزال مناسب؛
- أداء LC-MS على البروتين المخفض؛
- تحليل بيانات LC-MS.
الوزن الجزيئي منزوع الغليكوزيل N:
- إزالة N-glycans باستخدام إنزيم مناسب؛
- أداء LC-MS على البروتين N-deglycosylated؛
- تحليل بيانات LC-MS.
الوزن الجزيئي المنخفض والمنزوع الغليكوزيل N:
- معالجة عينة البروتين بعامل اختزال مناسب؛
- إزالة N-glycans باستخدام إنزيم مناسب؛
- أداء LC-MS على البروتين المخفض وN-deglycosylated؛
- تحليل بيانات LC-MS.
الوزن الجزيئي لوحدة البروتين الفرعية:
- انقسام الوحدة الفرعية
- أداء LC-MS على الوحدة الفرعية للبروتين
- تحليل بيانات LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
لا
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
