يعد تحليل موقع N-Glycosylation أمرًا بالغ الأهمية لفهم وظائف الجليكانات. تستخدم شركة Yaohai Bio-Pharma التحليل اللوني السائل - قياس الطيف الكتلي (LC-MS) بعد الانقسام الأنزيمي لموقع N-Glycosylation.
لقد شاركنا في التوصيف الهيكلي للبروتين لمختلف الجزيئات الكبيرة، بما في ذلك لقاحات الوحدات الفرعية المؤتلفة، والأجسام النانوية/VHHs/الأجسام المضادة أحادية المجال (sdAbs)، وشظايا الأجسام المضادة، والهرمونات/الببتيدات، والسيتوكينات، وعوامل النمو (GF)، والإنزيمات، والكولاجينات، إلخ.
المتطلبات التنظيمية لموقع N-Glycosylation
وفقًا لتوجيهات ICH Q6B، "بالنسبة للبروتينات السكرية، يتم تحديد محتوى الكربوهيدرات (السكريات المحايدة والسكريات الأمينية وأحماض السياليك). علاوة على ذلك، يتم تحليل بنية سلاسل الكربوهيدرات، ونمط قليل السكاريد (المظهر الهوائي)، وموقع (مواقع) الارتباط بالجليكوزيل في سلسلة البولي ببتيد إلى أقصى حد ممكن.
المنهج التحليلي
تحليل الأداء |
طرق |
موقع N- الجليكوزيل |
التحليل اللوني السائل - قياس الطيف الكتلي (LC-MS) بعد الانقسام الأنزيمي |
الإجراءات
1. الهضم الإنزيمي للبروتين باستخدام التربسين أو الأنزيم البروتيني الآخر
2. جزء منفصل من الببتيدات السكرية
3. قم بتأكيد موقع N-glycosylation بواسطة LC-MS
4. تحليل البيانات