يعد تحديد ملامح N-glycans ضروريًا لإنتاج المستحضرات الصيدلانية الحيوية. توفر شركة Yaohai Bio-Pharma خدمة تحديد مواصفات N-glycan باستخدام التحليل اللوني السائل - قياس الطيف الكتلي (LC-MS) للجليكانات الصادرة والموسومة. تشمل الخطوات العامة لإعداد عينة N-glycans هضم البروتين السكري (GP)، وإزالة الغليكوزيل، والتنقية، ووضع العلامات/الاشتقاق، واستخراج المرحلة الصلبة (SPE).
لقد شاركنا في التوصيف الهيكلي للبروتين لمختلف الجزيئات الكبيرة، بما في ذلك لقاحات الوحدات الفرعية المؤتلفة، والأجسام النانوية/VHHs/الأجسام المضادة أحادية المجال (sdAbs)، وشظايا الأجسام المضادة، والهرمونات/الببتيدات، والسيتوكينات، وعوامل النمو (GF)، والإنزيمات، والكولاجينات، إلخ.
المتطلبات التنظيمية لتصنيف N-Glycan
وفقًا لتوجيهات ICH Q6B، "بالنسبة للبروتينات السكرية، يتم تحديد محتوى الكربوهيدرات (السكريات المحايدة والسكريات الأمينية وأحماض السياليك). بالإضافة إلى ذلك، يتم تحليل بنية سلاسل الكربوهيدرات، ونمط قليل السكاريد (المظهر الهوائي)، وموقع (مواقع) الارتباط بالجليكوزيل لسلسلة البولي ببتيد إلى أقصى حد ممكن.
المنهج التحليلي
| تحليل الأداء |
طرق |
| التنميط N- جليكان |
التحليل اللوني السائل - قياس الطيف الكتلي (LC-MS) للجليكانات الصادرة والمسمى |
الإجراءات
1. إطلاق الغليكان الأنزيمي مع الببتيد N-Glycosidase F (PNGase F)
2. اشتقاق الجليكانات المنطلقة بواسطة 2-أمينوبنزاميد (2-AB)
3. تنقية N-glycans المحصودة على عمود TSK Amide - 80 في حالة وجود كميات كبيرة من المنظفات أو الأملاح غير المتطايرة أو المواد التي تحتوي على مجموعات أمينية حرة.
4. وضع العلامات بواسطة الفلورسنت 2-أمينوبنزاميدي (2-AB)
5. تحليل LC-MS للN-glycans المسمى
6. تحليل البيانات
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
لا
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
