أهمية تطوير العملية العلوية
العملية العلوية (USP)، والتي تُعرف أيضًا بعملية التخمير، هي واحدة من المراحل الأولى لمعالجة البيولوجيا العلوية. تعتبر عملية التخمير الميكروبي حاسمة لتحقيق كثافة عالية لنمو الخلايا والتعبير عن الجينات الخارجية، مما يؤثر مباشرة على إنتاجية الأدوية البيولوجية وتكلفتها.
في المراحل المبكرة لتطوير الأدوية البيولوجية (ما قبل السريرية أو المرحلة 1/2)، يتم التركيز على تطوير عمليات خالية من المواد الحيوانية قابلة للتدرج مع إنتاجية متوسطة، وتلبية جميع المعايير المتعلقة بجودة المنتج.
في حين أننا في المراحل المتقدمة (المرحلة 3 أو التجارية)، سنركز على العائد، والمتانة، والقابلية للتوسع، والقابلية للتكرار، مما يتيح عملية كفؤة من حيث التكلفة. الأنشطة التي تتناول هذه القضايا هي دراسات تعريف العملية وتصديق العملية. في الوقت نفسه، يتم عادةً تطبيق أدوات مثل الجودة بالتصميم (QbD) وأدوات تصميم التجارب (DoE).
الكلمات الرئيسية: تطوير العملية، الأمثلة والتقييم، عملية التخمير، تخمير الخلايا الدقيقة، تخمير البكتيريا، تخمير الخميرة، التخمير الكثيف، تخمير السلالات المعدلة وراثيًا
التطبيق: صناعة البيوفارما، الطب البشري، الطب البيطري، اللقاحات، الأدوية الحيوية الكبيرة الجزيئية المركبة، الأدوية الحيوية المركبة، المستحضرات الحيوية
حلول USP لشركة Yaohai Bio-Pharma
مستفيدين من أكثر من 10 سنوات من الخبرة في التخمير المجهرى، تمتلك شركة Yaohai Bio-Pharma الخبرة اللازمة لمساعدة العملاء في حل تحديات عملية التخمير. يمكننا إنشاء استراتيجيات التخمير الكثيف بسرعة لصالح العملاء. إيشيريشيا كولاي (E. coli) الأمانة المحيطة السرية، أو التعبير الذائب داخل الخلية أو جسم الشمول، والتعبير خارج الخلية أو داخل الخلية في الخمائر.
تشمل خدمات تطوير التخمير العامة المتاحة لدينا:
- تصميم عملية التخمير على نطاق صغير بحجم 7 لترات بطريقة التغذية الدفعة
- التحقق من العملية ثلاث مرات في أجهزة التخمير بحجم 7 لترات
- توسيع العملية إلى نطاق وسيط يصل إلى 30 لترًا / 70 لترًا
يمكننا تنفيذ الأمثلة متعددة العوامل بشكل مرنة لتحقيق الإنتاج أو النسبة المطلوبة باستخدام طريقة One-Time-A-Factor (OTAF) أو تصميم التجارب (DoE).
تُعرض المعلمات الرئيسية لعملية التخمير كما يلي:
تكوين وسائط التخمير الخالية من المنتجات الحيوانية
بدون مضادات حيوية أو معها، حجم البذر
درجة حرارة النمو، pH، مستوى الأكسجين الذائب (DO)
نمط التغذية (على سبيل المثال، التغذية الدفعة)
تركيز العامل الحاث (على سبيل المثال، IPTG، الميثانول)، نقطة الحث (وزن الخلية الرطب/OD600),
درجة حرارة الحث، وقت الحث
إلخ.
تفاصيل الخدمة
| خدمات |
سير العملية |
| التكاثر في زجاجة الاهتزاز (500 مل) |
إعداد وسيلة خالية من المواد الحيوانية → تكاثر البذور المجهرية → التكاثر في المرجّة → الحث → الحصاد |
| التكاثر في المخمر (7 لتر) |
إعداد وسيلة خالية من المواد الحيوانية → تكاثر البذور المجهرية → التخمير الكثيف للخلايا في مفاعل بيولوجي سعته 7 لتر → الحث → الحصاد |
| التحكم في جودة البروتينات/الببتيدات |
المعالجة المسبقة للتعبير الذري عن الجزيئات القابلة للذوبان: حصاد الخلايا الدقيقة وإعادة تعليقها → تكسير بالموجات فوق الصوتية → إزالة فضلات الخلايا → المستخلص الخام. التعبير عن الجسم الشامل: حصاد الخلايا الدقيقة وإعادة تعليقها → تكسير بالموجات فوق الصوتية → إعداد الجسم الشامل → المستخلص الخام. التعبير الذري القابل للذوبان خارج الخلية: جمع مصل الثقافة → التركيز وتغيير العازل → المستخلص الخام. تحليل الجودة: المستخلص الخام كعينة → تحليل البروتين المستهدف بواسطة SDS PAGE أو البلوت الغربي (WB) |
| رقابة الجودة على البلازميدات |
المعالجة المسبقة وتحليل الجودة: استخراج البلازميد → تحليل الحمض النووي باستخدام التحليل الكهربائي للجيل الagarose |
دراسة حالة
نحن مكلَّفون من قبل عميلنا لزيادة إنتاج الهرمون الببتيدي المستهدف من 8 جم/لتر إلى 10 جم/لتر.
استنادًا إلى تصميم العامل الكامل وتصميم سطح الاستجابة في أدوات DoE، تمكنا بسرعة من التعرف على تحسين المعلمات الرئيسية لعملية التخمير. تحت عملية التخمير الكثيفة ذات الخلايا المرتفعة المحسنة، ارتفع مستوى التعبير إلى 10 جم/لتر.
خبراتنا
- عملنا على أنواع مختلفة من المضيفات الدقيقة، على سبيل المثال، إي كولاي DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) و Hansenula polymorpha (H. polymorpha) .
- لدينا خبرة في إي. كولاي الإفراز البروتيني في السايتوبلASM، والتعبير القابل للذوبان أو داخل الجسم الشامل، وكذلك التعبير داخل الخلية أو خارج الخلية في الخميرة. يبلغ إنتاج الجسم الشامل ما يصل إلى 10 جم/لتر، بينما يتراوح إنتاج البروتين القابل للذوبان بين 0.5 و15 جم/لتر.
- كنا متورطين في تطوير وإنتاج مجموعة متنوعة من الجزيئات الكبيرة، بما في ذلك لقاحات الوحدة المعادة التركيب، والجسيمات الشبيهة بالفيروس (VLPs)، والهرمونات (الأنسولين، GLP-1، هرمون النمو)، والسيتوكينات (Interleukin-2/IL-2، IL-15، IL-21)، والعوامل النامية (EGF، FGF، NGF)، والنانوأجسام/ الأجسام المضادة أحادية المجال (sdAbs)، والإنزيمات، وغيرها.
- المعدات
7L*16 نظام التخمير
جهاز Cedex Bio Analyzer، جهاز تحليل العمليات الحيوية
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
