أهمية تطوير عملية ما بعد التدفق (DSP)
يحتوي المحلول الكامل للتخمير على البروتين المستهدف أو البلازميد، بالإضافة إلى الشوائب المتعلقة بالمنتج والعملية، مثل التجمعات، ومواد خلايا الميكروبات، وبروتينات خلايا المضيف (HCP)، وحمض دنا خلايا المضيف (HCD)، والنهايات السامة، والمضادات الحيوية.
لذلك، من الضروري تصميم عملية DSP فعالة، عملية تنقية، لإزالة بعض الشوائب وإنتاج مادة دوائية نقية عالي الجودة. بالإضافة إلى ذلك، يمكن أن يساعد تحسين عملية التنقية في زيادة استرداد المنتج، وتقليل التكاليف، وتحسين قابلية توسيع العملية وإعادتها.
كلمات مفتاحية: تطوير العملية، التحسين والتحقق، عملية التنقية، الكروماتوجرافيا، إزالة الشوائب، إزالة HCP، القضاء على HCD، إزالة النهايات السامة، تحلل البروتين وإعادة طيه، تركيب VLP، الارتباط
التطبيق: صناعة البيوفارما، الطب البشري، الطب البيطري، اللقاحات، الأدوية الحيوية الكبيرة الجزيئية المركبة، الأدوية الحيوية المركبة، المستحضرات الحيوية
حلول معالجة المواد بعد التخمير من ياوهاي بيو-فارما
لدينا خبرة واسعة في عزل البروتينات أو البلازميدات المستهدفة من المصفوفات المعقدة من خلال تطوير وتحسين عملية التنقية اللاحقة. هناك أنواع مختلفة من العمليات الوحدية التي تناسب تنقية المنتجات الحيوية، بما في ذلك الترسيب، الترشيح، التجانس، الانحلال القاعدي، الترشيح الفائق، الترسيب، إعادة تشكيل البروتينات، والكروماتوجرافيا وما إلى ذلك.
تشمل خدمات التطوير التنقية المتاحة لدينا:
- تطوير العملية الكاملة للتنقية من جمع الخلايا أو السائل فوق المغذية حتى المكون النشط النهائي.
- تحسين عملية التنقية بناءً على الشوائب المتعلقة بالمنتج أو العملية لزيادة جودة وسلامة المنتج، مثل HCP، HCD، الإندوتوكسين.
- تعريف وتحسين المعلمات الرئيسية في عملية وحدة واحدة أو عدة عمليات وحدة، بما في ذلك تحلل الخلايا، الترشيح بالتدفق المائل، فحص الراتينج، الكروماتوغرافيا، ت денاتور البروتين وإعادة طيه، إلخ.
- تحسين العملية من حيث الجودة، الإنتاجية، الاسترداد، التكلفة والقابلية للتوسع.
- التحقق من صحة عملية التنقية اللاحقة.
- تقييم نطاق المعلمات بناءً على المخاطر وتصميم التجارب (DoE) في نمذجة العملية.
تفاصيل الخدمة
منصات تنقية البروتين أو البلازميد القياسية تعتمد على خطوات تنقية خشنة متعددة وأقل من 4 خطوات كروماتوغرافية، بما في ذلك التقاط، التنقية الوسيطة، والتلميع.
| تفاصيل الخدمة |
عمليات الوحدة |
المواصفات |
| التنقية الأولية |
الطرد المركزي |
سرعة الدوران، الزمن |
| التجانس تحت الضغط العالي |
المحتوى الصلب الإجمالي، الضغط، الدورات |
| التفتيت القاعدي المستمر |
نسبة الخلايا المعلقة إلى محلول التفتيت، وقت التفتيت |
| ترشيح التدفق المماس |
مادة الغشاء وحجم المسام، معدل تدفق المادة الخام، الضغط العابر للغشاء (TMP)، نسبة حجم الفلتر إلى مساحة الغشاء |
| الترسيب |
نوع وتركيز المادة المترسبة، الإضافة، درجة الحموضة، درجة الحرارة، الزمن |
| إعادة الطي والتنكس |
ذوبانية بروتين جسم الشمولية |
تركيز المواد التنكسية (مثل اليوريا، كلوريد غوانيدين، المنظفات الأيونية القوية)، المنظفات (مثل صوديوم لوريل سلفات، SDS)، مواد خفض (مثل ثيوثريتول ثنائي الثيول، DTT)، مواد تكويك (حمض إيثيلين دي أمين تيترا أسيتيك، EDTA)، درجة الحرارة، الزمن |
| إعادة تشكيل البروتين |
طرق إعادة التشكيل (التنحيف، التنقية بالسماح أو إعادة تشكيل SEC)، تركيزات البروتين، العوامل المخففة، درجة الحموضة، درجة الحرارة، الزمن، المواد المؤكسدة والمضادة للأكسدة (على سبيل المثال، الجلوتاثيون، GSH / الجلوتاثيون المؤكسد، GSSH، DTT/GSSH، السيستين/السيستين)، الإضافات الصغيرة (L-arginine، اليوريا، الغوانيدين/HCl، والمنظفات) |
| التقاط، التطهير الجزئي، والتلميع |
AC (كروماتوجرافي الارتباط) |
أنواع متعددة من مادة الحشو الكروماتوجرافية/العمود (على سبيل المثال، AC، IEX، HIC، SEC، RPC، MMC)، طول وقطر العمود، تركيبة العامل المخفف، حجم الحقن، تركيبة الطور المتحرك (الامتصاص والإطلاق)، درجة الحموضة، معدل التدفق، شروط الارتباط، الغسيل، والتفريغ. |
| IEX (كروماتوجرافي التبادل الأيوني للأنيونات أو الكاتيونات) |
| HIC (كروماتوجرافي التفاعل الهيدروفوبي) |
| إزالة الأملاح و/أو كروماتوجرافي الاستبعاد الحجمي (SEC) |
| RPC (كروماتوجرافي الطور العكسي) |
| MMC، كروماتوجرافي الوضع المختلط |
دراسة حالة
الحالة 1
نحن مكلَّفون بتطوير وتحسين عملية التنقية اللاحقة لزيادة نقاء البروتين من 85% إلى 90% مع تقليل خطوات الكروماتوجرافي.
قدم ياوهاي عملية تنقية قوية وقابلة للتوسع تتضمن 3 خطوات من الكروماتوجرافي للبروتين المستهدف، وهو حساسية بكتيرية. ووصل النقاء النهائي إلى 95%.
الحالة 2
تم تعيين ياوهاي بواسطة عميلنا لتحسين عملية إزالة الإندوتوكسينات الخاصة بلقاح الجسيمات الشبيهة بالفيروس (VLP).
قام فريقنا بتحسين معلمات الكروماتوجرافي وإعداد مادة دوائية بنقاء بنسبة 98% وبقايا الإندوتوكسينات بمقدار 12.8EU/mg.
خبراتنا
- كنا متورطين في تطوير وإنتاج أنواع مختلفة من الجزيئات الكبيرة، بما في ذلك اللقاحات الفرعية المُعاد تشكيلها، والجسيمات الشبيهة بالفيروس (VLPs)، والهرمونات (الإنسولين، GLP-1، هرمون النمو)، والسايتوكيينات (Interleukin-2/IL-2، IL-15، IL-21)، والعوامل النامية (EGF، FGF، NGF)، والنانونابوديز/الантيبوديز ذات المجال الواحد (sdAbs)، والأنزيمات، وغيرها.
المعدات
نستخدم أنظمة AKTA Pure، AKTA Avant، و HPLC التحضيرية الرائدة في الصناعة لأداء مختلف طرق الكروماتوغرافيا بما في ذلك الكروماتوغرافيا بالارتباط، تبادل الأيونات، التفاعل الهيدروفوبي، العكس الطوري، والكروماتوغرافيا باستبعاد الحجم.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
