Согласно центральной догме, информационная РНК (мРНК) является мостом для передачи генетического материала от ДНК к белкам.
мРНК играет биологическую роль, кодируя белки in vivo, а зрелая мРНК в эукариотических организмах состоит из пяти компонентов: 5'-кэп (структура кэпа), 5'-UTR (некодирующая область), ORF (открытая рамка считывания), 3'-UTR. и 3'-хвост полиА (полиаденилатный хвост).
Подробности об услугах
| Обработка | Дополнительная услуга | Сервис Подробнее | Срок доставки (день) |
| Дизайн и оптимизация последовательности мРНК | Проектирование и оптимизация последовательностей кодирования | Выравнивание последовательности CDS Оптимизация кодонов CDS | 1 |
| Проектирование и оптимизация некодирующих последовательностей | Разработка и оптимизация последовательности 5'-UTR Разработка и оптимизация последовательности 3'-UTR разработка и оптимизация последовательности полиА | 1-2 |
Настраиваемые параметры
| 5' УТР/3' УТР | - Природная последовательность UTR
- Мутантная/инженерная последовательность UTR
|
| 3 'ПолиА Хвост | - 100–120 А, хвостовик (рекомендуется)
- Сегментированный хвост из полиА
- Другой пользовательский хвост
|
Общие стратегии проектирования последовательностей мРНК
| Компоненты мРНК | Биологические функции | Стратегии оптимизации |
| 5-футовая кепка | Защищают мРНК от деградации экзонуклеазами и действуют совместно с полиА-хвостом на 3'-конце, полиА-связывающим белком и белком-фактором инициации трансляции, инициируя трансляцию белка. | Естественная структура Cap1 позволяет избежать рецепторов, распознающих образы, и, таким образом, снижает естественный иммунный ответ, чего можно достичь путем одноэтапного котранскрипционного кэпирования или двухэтапного ферментативного кэпирования (подробности см. в разделе «Ферментативное кэпирование мРНК и котранскрипционное кэпирование»). |
| 5' УТР | 5'-UTR может распознаваться рибосомами, регулировать трансляцию мРНК и влиять на стабильность мРНК. | Содержат последовательности Козака без очень стабильной вторичной структуры. Природные UTR высокоэкспрессируемых генов предпочтительны для мРНК транскрипции in vitro (IVT), таких как α-глобин и β-глобин. |
| CDS | Белкокодирующие области и последовательности, кодирующие антигены, антитела или другие функциональные белки. | Оптимизация кодонов увеличивает уровень трансляции, отмечая, что некоторые неоптимальные кодоны могут играть роль в сворачивании белка. |
| 3' УТР | Регулируют трансляцию и стабильность мРНК. | Природные UTR высокоэкспрессируемых генов являются предпочтительными для мРНК IVT, таких как α-глобин и β-глобин. |
| 3-футовый полиА-хвост | Регулирует экспрессию белка и защищает структуру кэпа от деградации. | Требуется адекватная длина (100-150 пар оснований); кодирование хвоста полиА на матричной плазмиде транскрипции обеспечивает более определенную длину хвоста полиА. |
Наши функции
- Диверсифицированный выбор источника UTR
Множественные источники высокоэкспрессированных природных и модифицированных библиотек UTR; зрелая стратегия модификации UTR;
- Передовая команда по оптимизации CDS
Сотрудничайте с профессиональной командой алгоритмов искусственного интеллекта для завершения оптимизации кодонов.
- Равномерное распределение хвостов полиА
Добавьте последовательности полиА в соответствии с шаблонами ДНК, чтобы более точно контролировать длину мРНК.
- Разнообразные комбинации оптимизации
Достичь эффективной экспрессии мРНК с низкой иммуногенностью.
Пример
Дизайн последовательности мРНК с двойным репортером: мРНК mCherry-eGFP
Служба мРНК Yaohai Bio-Pharma продолжает модернизироваться за счет разработки и оптимизации тандемной последовательности двойного репортерного гена, которая обеспечивает совместную экспрессию двойных генов.
Используя обычный реагент для трансфекции, мРНК двойной генной тандемной последовательности mCherry-eGFP трансфицируют в клетки 293T, и два флуоресцентных сигнала mCherry (красный) и усиленного зеленого флуоресцентного белка (eGFP) обнаруживаются с одновременной экспрессией через 48 часов, и график выделен желтым цветом.
Экспрессия мРНК mCherry-eGFP в клетке 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕТ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
