Основой инкапсуляции является проектирование и разработка системы доставки. Хорошо продуманная система доставки позволяет молекулам циркРНК проникать в организм без разрушения ферментами РНК, а затем эффективно доставляться к месту-мишени, пересекать клеточную мембрану и высвобождаться внутриклеточно.
Липидные наночастицы (ЛНЧ) являются лучшей доступной системой доставки, имеющей преимущества в инкапсуляции, экспрессии in vivo и безопасности in vivo по сравнению с другими системами доставки. ЛНЧ с фрагментами нуклеиновых кислот легко засасываются в клетки и образуют внутриклеточные тельца. Попадая в клетку, кислая среда внутриклеточного тела протонирует и положительно заряжает головку ионизированного липида, сливаясь таким образом с внутренней мембраной внутриклеточного тела и высвобождая нуклеиновую кислоту-мишень в клетку для действия.
Служба циркРНК Yaohai Bio-Pharma продолжает совершенствоваться и может предоставить услугу инкапсуляции циркРНК-LNP для оптимизации соответствующих критически важных параметров процесса и улучшения согласованности и воспроизводимости производства лекарств циркРНК.
Обработка | Сервис Подробнее | Срок доставки (день) | Ожидаемые результаты |
инкапсуляция циркРНК-ЛНП | Предварительная обработка материалов и жидкостей | 2 | Лекарственный продукт циркРНК-ЛНП (ДП) |
Смешивание микрофлюидных устройств | |||
Тангенциальная фильтрация потока | 1 | ||
Стерилизующая фильтрация | |||
контроль качества циркРНК-ЛНП | Эффективность инкапсуляции | 1 | Протокол испытаний |
Размер частиц и индекс полидисперсности | |||
Дзета потенциал |
Быстрый синтез, высокая эффективность исследований и разработок и предварительно оптимизированные решения;
Коэффициент инкапсуляции может достигать более 90%;
Размером липидных наночастиц можно управлять, изменяя скорость и соотношение закачки жидкости;
Продукты циркРНК-ЛНП подтверждены клеточной экспрессией in vitro и могут эффективно экспрессировать целевой белок.
Подготавливают образцы циркРНК LNP-eGFP и различные их дозы (1 мкг, 2 мкг и 4 мкг) непосредственно трансфицируют в клетки 293T, чтобы проверить, могут ли они экспрессировать целевой белок. Через 48 часов трансфекции можно наблюдать четкий флуоресцентный сигнал и наблюдается эффект увеличения дозы интенсивности флуоресценции.
Lipo-circ_eGFP, состоящий из липосом и неинкапсулированной циркРНК eGFP, взят в качестве контроля.