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Serviços de preparação de proteínas sem etiqueta

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Serviços de preparação de proteínas sem etiqueta

Os marcadores de proteína, como parceiros de fusão usados ​​em tecnologias de DNA recombinante, permitem uma purificação de afinidade eficaz e em uma única etapa para várias proteínas/peptídeos com características diferentes. Apesar desta importante vantagem, marcadores como aminoácidos exógenos podem alterar a estrutura proteica e as funções biológicas. Portanto, proteínas ou peptídeos não marcados (sem marcação) são mais preferidos para garantir segurança e eficácia, especialmente no campo biofarmacêutico. Uma proteína recombinante com uma etiqueta de fusão tem possibilidades limitadas de obtenção de autorização de agências de administração médica/de medicamentos.

Com base na plataforma de P&D de produtos biológicos microbianos, a Yaohai Bio-Pharma oferece serviços personalizados de preparação de proteínas sem etiqueta (sem etiqueta), dedicados a atender objetivos exclusivos de pesquisa, desenvolvimento e fabricação para uso clínico.

Palavras-chave: produção de proteína livre de etiqueta, purificação de proteína não marcada, preparação de proteína baseada em etiqueta livre, expressão e purificação de proteína sem etiqueta, proteína alvo altamente livre de etiqueta Aplicação: pesquisa em medicina humana, desenvolvimento de medicina animal, desenvolvimento de vacina recombinante, grande molécula recombinante produção biológica


Nossa plataforma de pesquisa e desenvolvimento microbiano

Temos experiência em engenharia de cepas microbianas, fermentação e purificação de produtos.

Bactérias: Escherichia coli (E. coli)

Levedura: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Opções personalizadas

ModalidadeProteína recombinante
Materiais iniciaisSequências genéticas, plasmídeos recombinantes ou cepas modificadas
EntregasPurificar: >80%, >85%, >90% Quantidade: 0.2~10 g (a ser determinado pelo projeto)
Sistema de expressão e formaçãoSecreção periplasmática de E. coli, expressão de corpos solúveis e de inclusão; Expressão intracelular ou de secreção de levedura
Métodos de análiseEnsaio de ácido ultravioleta (UV), bicinconínico (BCA), Bradford ou Lowry para quantidadeEletroforese em gel de poliacrilamida com dodecilsulfato de sódio (SDS-PAGE) para teste de purificaçãoOpcional: Western blot (WB), ensaio imunoenzimático (ELISA), alto desempenho cromatografia líquida (HPLC)
Impurezas residuaisEndotoxina (opcional)

Detalhes dos serviços

ServiçosDetalhes de serviçosCronograma Mínimo (dia útil)
Síntese genéticaOtimização de códon para host de expressão específico7 ~ dia 10
Síntese genética
Construção de plasmídeo/vetorClonagem em plasmídeo/vetor2 dias
Transformação de plasmídeo
Verificação da reação em cadeia da polimerase (PCR), digestão com enzimas de restrição, sequenciamento genético3 dias
Expressão proteica em E. coliTransformação de plasmídeo,2 dias
Cultivo em frasco shake3 dias
Fermentação saca 7L, otimização4 dias/lote
Purificação e otimização de proteínas sem tags5~10 dias/lote
Teste por eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecil-sulfato de sódio (SDS-PAGE)
Expressão proteica em leveduraPreparação de células competentes de levedura4 dias
Linearização de plasmídeos e eletrotransformação
Fermentação saca 7L, otimização5 dias
Purificação e otimização de proteínas sem tags7 dias/lote
Purificação de proteínas sem etiqueta5~10 dias/lote
CQ por SDS-PAGE

Serviços Adicionais (opcional)

Desenvolvimento do Processo de Fermentação

Desenvolvimento de processo de purificação de proteínas sem tags

Aumento de escala piloto e fabricação de GMP

Análise e Teste

Nossos recursos

Trabalhamos em mais de 300 cepas microbianas projetadas, incluindo E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115; Cepa PichiaPink 1/2/3/4; e H. polimorfo.

Temos experiência com secreção periplasmática de E. coli, expressão de corpos solúveis e de inclusão, bem como expressão intracelular ou de secreção de levedura.

Estabelecemos uma plataforma de triagem de alto rendimento para rastrear cepas estáveis ​​e de alta produção de mais de cem cepas candidatas.

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