Determinação de peso molecular por LC-MS
O peso molecular intacto sempre foi reconhecido como uma característica importante dos produtos biológicos. A análise de peso molecular intacto é usada para demonstrar os produtos proteicos/peptídeos e verificar os produtos biológicos. Medir o peso da molécula é um requisito das diretrizes regulatórias.
A Yaohai Bio-Pharma oferece análise de peso molecular intacto sob condições nativas, reduzidas e N-desglicosiladas. Empregamos cromatografia líquida-espectrometria de massa (LC-MS) para determinar o peso molecular intacto.
Requisitos regulamentares para peso molecular
É recomendado no ICH Q6 que “o peso molecular (ou tamanho) seja determinado usando cromatografia de exclusão de tamanho, eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida (sob condições redutoras e não redutoras), espectrometria de massa (MS) e outras técnicas apropriadas”.
Métodos analíticos
| Análise |
De Depósito |
| Peso molecular |
LC-MS / Cromatografia Líquida/Espectrometria de Massa por Eletrospray (LC/ES-MS) de proteínas ou subunidades N-desglicosiladas nativas, reduzidas |
Procedimentos analíticos
Peso molecular intacto:
- Realizando LC-MS na amostra nativa conforme recebida.
- Análise de dados LC-MS.
Peso molecular reduzido:
- Tratar a amostra de proteína com um agente redutor adequado;
- Realização de LC-MS na proteína reduzida;
- Análise de dados LC-MS.
Peso molecular N-desglicosilado:
- Remoção dos N-glicanos com uma enzima adequada;
- Realização de LC-MS na proteína N-desglicosilada;
- Análise de dados LC-MS.
Peso molecular reduzido e N-desglicosilado:
- Tratar a amostra de proteína com um agente redutor adequado;
- Remoção dos N-glicanos com uma enzima adequada;
- Realização de LC-MS em proteína reduzida e N-desglicosilada;
- Análise de dados LC-MS.
Peso molecular da subunidade proteica:
- Clivagem de Subunidade
- Realizando LC-MS na subunidade de proteína
- Análise de dados LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NÃO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
