A Yaohai Bio-Pharma oferece testes de sequência N-terminal e serviços de análise de dados baseados em Cromatografia Líquida-Espectrometria de Massa (LC-MS) ou método de degradação de Edman, que permite determinar os aminoácidos nos respectivos terminais da proteína de interesse. A modificação N-terminal também pode ser analisada por LC-MS.
Estamos envolvidos na caracterização estrutural de proteínas de várias moléculas grandes, incluindo vacinas de subunidades recombinantes, nanocorpos/VHHs/anticorpos de domínio único (sdAbs), fragmentos de anticorpos, hormônios/peptídeos, citocinas, fatores de crescimento (GF), enzimas, colágenos, etc.
Requisitos regulatórios para sequenciamento de terminais N
De acordo com as diretrizes ICH Q6B, é necessário confirmar a sequência da sua proteína e examinar os terminais em busca de qualquer variação que possa existir.
Métodos de sequenciamento de terminais N
| Análise |
Forma |
| Sequenciamento N-terminal |
Degradação de Edman, Cromatografia Líquida-Espectrometria de Massa (LC-MS) |
Procedimentos
LC-MS
1. Rotulagem fluorescente de proteína N-terminal
2. Digestões múltiplas
3. Análise LC-MS/espectrometria de massa (MS)
Degradação de Edman
1. Eletroforese em gel de Dodecil Sulfato de Sódio (SDS) da sua proteína alvo
2. Transferir gel para membranas de fluoreto de polivinilideno (PVDF) e coloração
3. Identifique e corte a banda da proteína alvo
4. Sequenciamento de Edman do terminal N
5. Análise de dados
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