Wszystkie kategorie
ENEN
Usługi przygotowywania białek bez znaczników

Usługi przygotowywania białek bez znaczników

Home >  Usługi przygotowywania białek bez znaczników

Usługi przygotowywania białek bez znaczników

Znaczniki białkowe, jako partnerzy fuzyjni wykorzystywani w technologiach rekombinacji DNA, umożliwiają skuteczne, jednoetapowe oczyszczanie na podstawie powinowactwa dla różnych białek/peptydów o różnych właściwościach. Pomimo tej ważnej zalety, znaczniki jako aminokwasy egzogenne mogą zmieniać strukturę białka i funkcje biologiczne. Dlatego też bardziej korzystne są nieznakowane (wolne od znaczników) białka lub peptydy, aby zapewnić bezpieczeństwo i skuteczność, szczególnie w dziedzinie biofarmaceutycznej. Rekombinowane białko ze znacznikiem fuzyjnym ma ograniczone możliwości uzyskania zezwolenia od agencji medycznych/administracji leków.

W oparciu o platformę badawczo-rozwojową w zakresie biologii mikrobiologicznej firma Yaohai Bio-Pharma oferuje dostosowane do indywidualnych potrzeb usługi nieoznaczonego (wolnego od znaczników) przygotowania białek, których celem jest osiągnięcie unikalnych celów w zakresie badań, rozwoju i produkcji do użytku klinicznego.

Słowa kluczowe: produkcja białek bez znaczników, oczyszczanie białek bez znaczników, preparatyka białek na bazie bezpłatnych znaczników, ekspresja i oczyszczanie białek bez znaczników, białko docelowe w dużym stopniu wolne od znaczników Zastosowanie: badania w zakresie medycyny ludzkiej, rozwój medycyny dla zwierząt, rozwój szczepionek rekombinowanych, rekombinowane duże cząsteczki produkcja leków biologicznych


Nasza platforma badawczo-rozwojowa w zakresie mikrobiologii

Mamy doświadczenie w inżynierii szczepów drobnoustrojów, fermentacji i oczyszczaniu produktów.

Bakterie: Escherichia coli (E. coli)

Drożdże: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula Polymorpha (H. Polymorpha)

Opcje niestandardowe

Modalność Rekombinowane białko
Materiały wyjściowe Sekwencje genów, rekombinowany plazmid lub zmodyfikowane szczepy
Dostarczane Oczyszczanie: >80%, >85%, >90% Ilość: 0.2~10 g (do ustalenia w projekcie)
System ekspresji i tworzenie Wydzielanie peryplazmatyczne E. coli, ekspresja ciałek rozpuszczalnych i inkluzyjnych; Ekspresja wewnątrzkomórkowa lub wydzielnicza drożdży
Metody analizy Ultrafiolet (UV), test kwasu bicynchinowego (BCA), Bradford lub Lowry for Quantity Elektroforeza w żelu poliakryloamidowym z dodecylosiarczanem sodu (SDS-PAGE) do badania oczyszczania Opcjonalnie: Western blot (WB), enzymatyczny test immunoabsorpcyjny (ELISA), wysoka wydajność chromatografia cieczowa (HPLC)
Pozostałości zanieczyszczeń Endotoksyna (opcjonalnie)

Szczegóły usług

Usługi Szczegóły usługi Minimalna oś czasu (dzień roboczy)
Synteza genów Optymalizacja kodonów dla konkretnego gospodarza ekspresyjnego 7 ~ dni 10
Synteza genów
Konstrukcja plazmidowa/wektorowa Klonowanie do plazmidu/wektora 2 dni
Transformacja plazmidowa
Weryfikacja metodą reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR), trawienie enzymami restrykcyjnymi, sekwencjonowanie genów 3 dni
Ekspresja białka w E. coli transformacja plazmidowa, 2 dni
Uprawa w wytrząsanej kolbie 3 dni
Fermentacja sakli 7L, optymalizacja 4 dni/partia
Oczyszczanie białek bez znaczników, optymalizacja 5 ~ 10 dni / partia
Badanie metodą elektroforezy w żelu poliakrylamidowym z dodecylosiarczanem sodu (SDS-PAGE)
Ekspresja białek w drożdżach Przygotowanie komórek kompetentnych drożdży 4 dni
Linearyzacja i elektrotransformacja plazmidów
Fermentacja sakli 7L, optymalizacja 5 dni
Oczyszczanie białek bez znaczników, optymalizacja 7 dni/partia
Oczyszczanie białek bez znaczników 5 ~ 10 dni / partia
Kontrola jakości przez SDS-PAGE

Usługi dodatkowe (opcjonalne)

Rozwój procesu fermentacji

Rozwój procesu oczyszczania białek bez znaczników

Skalowanie pilotażowe i produkcja GMP

Analiza i testowanie

Nasze funkcje

Pracowaliśmy nad ponad 300 zmodyfikowanymi szczepami drobnoustrojów, w tym E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115; PichiaPink szczep 1/2/3/4; i H. Polymorpha.

Mamy doświadczenie w wydzielaniu peryplazmatycznym E. coli, ekspresji ciałek rozpuszczalnych i inkluzyjnych, a także wewnątrzkomórkowej lub wydzielniczej ekspresji drożdży.

Tworzymy wysokowydajną platformę przesiewową do badania wysokowydajnych i stabilnych szczepów spośród ponad stu kandydatów.

Uzyskaj bezpłatną wycenę

Skontaktuj się z nami