Wszystkie kategorie
ENEN
Usługi przygotowywania białek bez znaczników

Usługi przygotowywania białek bez znaczników

Home >  Usługi przygotowywania białek bez znaczników

Usługi przygotowywania białek bez znaczników

Znaczniki białkowe, jako partnerzy fuzyjni wykorzystywani w technologiach rekombinacji DNA, umożliwiają skuteczne, jednoetapowe oczyszczanie na podstawie powinowactwa dla różnych białek/peptydów o różnych właściwościach. Pomimo tej ważnej zalety, znaczniki jako aminokwasy egzogenne mogą zmieniać strukturę białka i funkcje biologiczne. Dlatego też bardziej korzystne są nieznakowane (wolne od znaczników) białka lub peptydy, aby zapewnić bezpieczeństwo i skuteczność, szczególnie w dziedzinie biofarmaceutycznej. Rekombinowane białko ze znacznikiem fuzyjnym ma ograniczone możliwości uzyskania zezwolenia od agencji medycznych/administracji leków.

W oparciu o platformę badawczo-rozwojową w zakresie biologii mikrobiologicznej firma Yaohai Bio-Pharma oferuje dostosowane do indywidualnych potrzeb usługi nieoznaczonego (wolnego od znaczników) przygotowania białek, których celem jest osiągnięcie unikalnych celów w zakresie badań, rozwoju i produkcji do użytku klinicznego.

Słowa kluczowe: produkcja białek bez znaczników, oczyszczanie białek bez znaczników, preparatyka białek na bazie bezpłatnych znaczników, ekspresja i oczyszczanie białek bez znaczników, białko docelowe w dużym stopniu wolne od znaczników Zastosowanie: badania w zakresie medycyny ludzkiej, rozwój medycyny dla zwierząt, rozwój szczepionek rekombinowanych, rekombinowane duże cząsteczki produkcja leków biologicznych


Nasza platforma badawczo-rozwojowa w zakresie mikrobiologii

Mamy doświadczenie w inżynierii szczepów drobnoustrojów, fermentacji i oczyszczaniu produktów.

Bakterie: Escherichia coli (E. coli)

Drożdże: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula Polymorpha (H. Polymorpha)

Opcje niestandardowe

ModalnośćRekombinowane białko
Materiały wyjścioweSekwencje genów, rekombinowany plazmid lub zmodyfikowane szczepy
DostarczaneOczyszczanie: >80%, >85%, >90% Ilość: 0.2~10 g (do ustalenia w projekcie)
System ekspresji i tworzenieWydzielanie peryplazmatyczne E. coli, ekspresja ciałek rozpuszczalnych i inkluzyjnych; Ekspresja wewnątrzkomórkowa lub wydzielnicza drożdży
Metody analizyUltrafiolet (UV), test kwasu bicynchinowego (BCA), Bradford lub Lowry for Quantity Elektroforeza w żelu poliakryloamidowym z dodecylosiarczanem sodu (SDS-PAGE) do badania oczyszczania Opcjonalnie: Western blot (WB), enzymatyczny test immunoabsorpcyjny (ELISA), wysoka wydajność chromatografia cieczowa (HPLC)
Pozostałości zanieczyszczeńEndotoksyna (opcjonalnie)

Szczegóły usług

UsługiSzczegóły usługiMinimalna oś czasu (dzień roboczy)
Synteza genówOptymalizacja kodonów dla konkretnego gospodarza ekspresyjnego7 ~ dni 10
Synteza genów
Konstrukcja plazmidowa/wektorowaKlonowanie do plazmidu/wektora2 dni
Transformacja plazmidowa
Weryfikacja metodą reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR), trawienie enzymami restrykcyjnymi, sekwencjonowanie genów3 dni
Ekspresja białka w E. colitransformacja plazmidowa,2 dni
Uprawa w wytrząsanej kolbie3 dni
Fermentacja sakli 7L, optymalizacja4 dni/partia
Oczyszczanie białek bez znaczników, optymalizacja5 ~ 10 dni / partia
Badanie metodą elektroforezy w żelu poliakrylamidowym z dodecylosiarczanem sodu (SDS-PAGE)
Ekspresja białek w drożdżachPrzygotowanie komórek kompetentnych drożdży4 dni
Linearyzacja i elektrotransformacja plazmidów
Fermentacja sakli 7L, optymalizacja5 dni
Oczyszczanie białek bez znaczników, optymalizacja7 dni/partia
Oczyszczanie białek bez znaczników5 ~ 10 dni / partia
Kontrola jakości przez SDS-PAGE

Usługi dodatkowe (opcjonalne)

Rozwój procesu fermentacji

Rozwój procesu oczyszczania białek bez znaczników

Skalowanie pilotażowe i produkcja GMP

Analiza i testowanie

Nasze funkcje

Pracowaliśmy nad ponad 300 zmodyfikowanymi szczepami drobnoustrojów, w tym E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115; PichiaPink szczep 1/2/3/4; i H. Polymorpha.

Mamy doświadczenie w wydzielaniu peryplazmatycznym E. coli, ekspresji ciałek rozpuszczalnych i inkluzyjnych, a także wewnątrzkomórkowej lub wydzielniczej ekspresji drożdży.

Tworzymy wysokowydajną platformę przesiewową do badania wysokowydajnych i stabilnych szczepów spośród ponad stu kandydatów.

Uzyskaj bezpłatną wycenę

Skontaktuj się z nami