Plazmidowy DNA, jak in vitro Matryca transkrypcyjna (IVT) jest ważnym surowcem do wytwarzania mRNA. Najważniejsza jest wysoka wydajność, wysoki stopień oczyszczenia i wysoki odzysk plazmidowego DNA cel podczas rozwoju procesu plazmidowego.
Yaohai Bio-Pharma zapewnia kompleksowe rozwiązanie w zakresie opracowywania plazmidów, obejmujące rozwój procesów poprzedzających (fermentacja), końcowych (oczyszczanie) oraz charakterystykę procesu i walidację procesu. Mamy duże doświadczenie w ulepszaniu wydajności plazmidów i izolowaniu ich ze złożonych matryc poprzez opracowywanie i optymalizację procesów fermentacji, oczyszczania i usuwania zanieczyszczeń.
Podstawowy bioproces wytwarzania plazmidów obejmuje: Escherichia coli (E. coli) fermentacja, zbiór komórek i liza alkaliczna, klarowanie, zatężanie, trzyetapowy proces chromatografii (wychwytywanie, pośrednie oczyszczanie i polerowanie) oraz zatężanie.
Szczegóły usługi | Operacje jednostek | parametry |
E. coli fermentacja |
Wstrząsnąć kolbą | Skład podłoża, antybiotyk, objętość inokulum, temperatura wzrostu itp. |
Fermentator (7 l) |
Antybiotyk, objętość inokulum, temperatura wzrostu, pH, rozpuszczony tlen (DO), tryb karmienia (np. okresowe), pożywki, czas fermentacji itp. |
|
Zbiór komórek | Mikrofiltracja | Standard E. coli proces zbioru |
Liza komórek | Ponowne zawieszenie komórek, liza alkaliczna, neutralizacja | Stosunek alkaliów, czas lizy |
Wyjaśnienie | Sączenie | Filtracja surowa, zestaw filtrów 20 µm i 5 µm (preferowany) |
Stężenie | Ultrafiltracja, filtracja z przepływem stycznym | Wielkość porów (lub NMWC), ciśnienie transbłonowe (TMP), strumień, stosunek objętości filtratu do powierzchni membrany |
Chromatografia trójetapowa | Chromatografia wykluczania (SEC) lub chromatografia żelowo-filtracyjna (GFC) | Długość i średnica kolumny, skład buforu, objętość wtrysku, skład fazy ruchomej (adsorpcja i desorpcja), pH, natężenie przepływu, równowaga, wiązanie, przemywanie i warunki elucji. |
Chromatografia powinowactwa (AF) | ||
Chromatografia anionowymienna (AEX) | ||
Stężenie | Ultrafiltracja, filtracja z przepływem stycznym | Wielkość porów (lub NMWC), ciśnienie transbłonowe (TMP), strumień, stosunek objętości filtratu do powierzchni membrany |
Więcej rozwiązań procesów oczyszczania produktów biologicznych |