Yaohai Bio-Pharma oferuje usługi testowania sekwencji N-końca i analizy danych w oparciu o metodę chromatografii cieczowej ze spektrometrią mas (LC-MS) lub metodę degradacji Edmana, która pozwala określić aminokwasy na odpowiednich końcach interesującego białka. Modyfikację N-końcową można również analizować za pomocą LC-MS.
Braliśmy udział w charakteryzacji strukturalnej białek różnych dużych cząsteczek, w tym rekombinowanych szczepionek podjednostkowych, nanociał/VHH/przeciwciał jednodomenowych (sdAbs), fragmentów przeciwciał, hormonów/peptydów, cytokin, czynników wzrostu (GF), enzymów, kolagenów, itp.
Wymagania regulacyjne dotyczące sekwencjonowania terminala N
Zgodnie z wytycznymi ICH Q6B konieczne jest potwierdzenie sekwencji białka i zbadanie końcówek pod kątem ewentualnych różnic.
N Metody sekwencjonowania terminali
| Analiza |
Metoda wykonania |
| Sekwencjonowanie N-końcowe |
Degradacja Edmana, chromatografia cieczowa-spektrometria mas (LC-MS) |
Procedury
LC-MS
1. Znakowanie fluorescencyjne N-końcowego białka
2. Wielokrotne trawienie
3. Analiza LC-MS/spektrometria mas (MS).
Degradacja Edmana
1. Elektroforeza żelowa docelowego białka z dodecylosiarczanem sodu (SDS).
2. Przenieść żel na membrany z polifluorku winylidenu (PVDF) i przeprowadzić barwienie
3. Zidentyfikuj i wytnij docelowy prążek białka
4. Sekwencjonowanie Edmana N-końca
5. Analiza danych
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NIE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
