Analiza miejsca N-glikozylacji ma kluczowe znaczenie dla zrozumienia funkcji glikanów. Yaohai Bio-Pharma wykorzystuje chromatografię cieczową ze spektrometrią mas (LC-MS) po rozszczepieniu enzymatycznym w celu uzyskania miejsca N-glikozylacji.
Braliśmy udział w charakteryzacji strukturalnej białek różnych dużych cząsteczek, w tym rekombinowanych szczepionek podjednostkowych, nanociał/VHH/przeciwciał jednodomenowych (sdAbs), fragmentów przeciwciał, hormonów/peptydów, cytokin, czynników wzrostu (GF), enzymów, kolagenów, itp.
Wymagania prawne dotyczące miejsca N-glikozylacji
Zgodnie z wytycznymi ICH Q6B „w przypadku glikoprotein określa się zawartość węglowodanów (cukrów obojętnych, aminocukrów i kwasów sialowych). Ponadto w możliwie największym stopniu analizuje się strukturę łańcuchów węglowodanowych, wzór oligosacharydów (profil antenowy) i miejsce(a) glikozylacji łańcucha polipeptydowego.
Metoda analityczna
| Analiza |
Metody |
| Miejsce N-glikozylacji |
Chromatografia cieczowa-spektrometria mas (LC-MS) po rozszczepieniu enzymatycznym |
Procedury
1. Trawienie enzymatyczne białka przy użyciu trypsyny lub innej proteazy
2. Oddzielne fragmenty glikopeptydów
3. Potwierdzić miejsce N-glikozylacji metodą LC-MS
4. Analizuj dane
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NIE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
