Biologiczne substancje lecznicze to złożone, duże cząsteczki, szczególnie wrażliwe na czynniki środowiskowe: temperaturę, utlenianie, światło, zawartość jonów i ścinanie. Niezwykle istotne jest przeprowadzenie badań stabilności substancji leczniczej i produktu leczniczego w zamierzonych warunkach przechowywania, warunkach przyspieszonych i warunkach wymuszonej degradacji. Dane dotyczące stabilności są zwykle wykorzystywane do potwierdzenia okresu ważności, daty ważności i warunków przechowywania.
Zgodnie z wytycznymi ICH Q5C firma Yaohai Bio-Pharma oferuje usługi badania stabilności białek, peptydów, plazmidów i mRNA, obejmujące badania stabilności długoterminowej, badania stabilności przyspieszonej i badania wymuszonej degradacji. Ponadto posiadamy wszystkie niezbędne możliwości przechowywania próbek i analizy krytycznych atrybutów jakości (CQA) w celu gromadzenia danych dotyczących stabilności.
Wymagania regulacyjne dotyczące badań stabilności
Zgodnie z wytycznymi ICH Q5C: „Należy opracować odpowiednie dane potwierdzające stabilność produktu biotechnologicznego/biologicznego, ponieważ wiele warunków zewnętrznych może mieć wpływ na moc, czystość i jakość produktu. Zdecydowanie zaleca się także prowadzenie badań substancji leczniczej i produktu leczniczego w warunkach przyspieszonych i stresowych.
Badania stabilności w czasie rzeczywistym (długoterminowe).
W badaniach stabilności (długoterminowej) w czasie rzeczywistym substancja lecznicza lub produkt leczniczy jest przechowywana w zamierzonych warunkach przechowywania i monitorowana do czasu, aż charakterystyka biologiczna zmieni się poza dopuszczalne granice. W wyniku długoterminowych badań stabilności można ustalić okres przydatności do spożycia, datę ważności, warunki przechowywania oraz częstotliwość pobierania próbek/testów.
Tabela 1. Częstotliwość badań w badaniach stabilności długoterminowej leków biologicznych przed dopuszczeniem do obrotu
| Okres trwałości |
Interwały testowania |
Punkty czasowe |
| 1 rok lub mniej |
Co miesiąc przez pierwsze 3 miesiące;
Następnie co 3 miesiące
|
W 0, 1, 2, 3, 6, 9 i 12 miesiącach |
| Ponad 1 rok |
Co 3 miesiące przez pierwszy rok;
Co 6 miesięcy przez drugi rok;
Później corocznie
|
Po 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 miesiącach, a następnie corocznie |
Przyspieszone badania stabilności
Zalecana temperatura przechowywania biofarmaceutyków do wstrzykiwań wynosi zwykle od 2 do 8 ℃. Przyspieszone badania stabilności prowadzi się w krótszym czasie, w warunkach przyspieszonych, takich jak wysoka temperatura. Dane dotyczące stabilności uznawane są za informacje pomocnicze dotyczące stabilności produktu i są szeroko stosowane przy określaniu okresu przydatności do spożycia i daty ważności, a także opracowywaniu receptur.
Tabela 2. Przykłady przyspieszonych badań stabilności
| Badania stabilności |
Przyspieszone warunki |
Punkty próbkowania |
| Przyspieszone badania stabilności |
podwyższona temperatura
Wilgotność względna
|
W 0, 1, 2, 3, 6 miesiącu |
Badania wymuszonej degradacji
Celem badań wymuszonej degradacji jest zebranie informacji o stabilności w warunkach naprężeń, takich jak wysoka temperatura, wilgotność, światło, utlenianie, zamrażanie-rozmrażanie lub naprężenia mechaniczne (wstrząsanie, ścinanie). Badania wymuszonej degradacji substancji leczniczej lub produktu leczniczego w ekstremalnych warunkach mogą pomóc w rozpoznaniu kluczowych czynników/parametrów prowadzących do degradacji leków biologicznych. Dane te są przydatne do oceny odporności procesu formułowania i wytwarzania.
Tabela 3. Przykłady badań wymuszonej degradacji
| Napięcia |
Warunki stresowe |
Czas trwania |
| Temperatura |
Wysoka temperatura (np. 25℃, 30℃, 37℃, 40℃) |
Dni-miesiące |
| Wilgotność |
Wilgotność względna (0 ~ 100%) |
Dni-miesiące |
| Światło |
Minimum 1.2 mln lx h i 200 W h/m2 |
Kilka dni |
| Zamrażanie i rozmrażanie |
zamrażanie-rozmrażanie (od -20℃, -80℃ do 15℃) |
1 ~ 5 cykli |
| Potrząsanie, mieszanie |
50 ~ 500 rpm |
Godziny-dni |
Metody analityczne wspomagające badania stabilności
| Krytyczne atrybuty jakości (CQA) |
Metody analityczne |
| Całkowita zawartość białka |
UV, BCA, Bradford, Lowry |
| Widoczne cząstki |
Oględziny |
| Agregacja, fragmenty |
Dynamiczne rozpraszanie światła Chromatografia wykluczania (SEC) HPLC/UPLC, Elektroforeza kapilarna CE (CGE, CZE, cIEF/iCIEF), Nieredukująca SDS-PAGE |
| Mapowanie i sekwencjonowanie peptydów |
LC-MS/MS |
| Wiązania dwusiarczkowe |
LC-MS/MS |
| PTM (utlenianie, izomeryzacja, deamidacja, glikozylacja) |
LC-MS/MS |
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NIE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
