Ingénierie des contraintes
L’importance de l’ingénierie des contraintes
L'ingénierie des souches vise à rendre l'expression hôte présentant les caractéristiques attendues, ce qui est nécessaire au développement des CMC biologiques et détermine la qualité et la cohérence du produit et du processus de fabrication.
Mots clés : génie génétique et criblage de souches, construction de souches d'expression protéique, ingénierie de cellules microbiennes, ingénierie de souches bactériennes, ingénierie de souches de levure, construction de micro-organismes procaryotes, ingénierie de micro-organismes eucaryotes, souche modifiée
Application : médecine humaine, médecine animale, vaccin, biologie synthétique, produits biologiques recombinants à grosses molécules, réactif biologique
Services d'ingénierie de souches de Yaohai Bio-Pharma
Bénéficiant de plus de 10 ans d’expérience CDMO dans les produits biologiques microbiens, nous avons accumulé une riche expérience dans l’ingénierie et la sélection de divers types de vecteurs plasmidiques et d’hôtes microbiens (bactéries, levures). Nous pouvons trouver le meilleur système d’expression pour vos produits biologiques uniques.
Nous avons collecté divers hôtes microbiens avec des sources claires et un CoA standard, notamment
Bactéries Escherichia coli (E. coli)
Levure: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Détails du service
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Services
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Détails du service
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Délai minimum/jour
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(produits) livrables
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Ingénierie des contraintes
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knock-out de gène ou suppression de gène
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À déterminer
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Rapport d'ingénierie de déformation
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Gene knock-in ou insertion de gène
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Construction de souches (E. coli)
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Transformation plasmidique (multi-hôtes)
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5
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COA des hébergeurs commerciaux,
Rapport de construction de souche
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Vérification PCR
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Purification des souches
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Préservation des souches
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Construction de souche (levure)
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Préparation de cellules de levure compétentes
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10
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Linéarisation plasmidique
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Transformation électro
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Dépistage des résistances/carences nutritionnelles
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Purification des souches
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Préservation des souches
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Sélection d’hôtes appropriés
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Extraction d'ADN plasmidique ou génomique
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15-20
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Processus de sélection des hôtes,
Rapport de test des souches modifiées
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Vérification PCR, digestion par enzymes de restriction
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Séquençage du gène cible
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Criblage d'hôtes à haute expression
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Criblage d’hôtes présentant une stabilité génétique
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Préservation des souches
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Étude de cas
L'ingénierie Hansenula polymorpha a amélioré le rendement d'expression du HPV L1 VLP.
Nous avons établi de la levure Hansenula polymorpha (H. polymorpha) plateforme d'ingénierie et de criblage pour l'expression de protéines/peptides recombinants. Dans un premier temps, nous avons généré H. polymorphe souches déficientes en protéase par suppression ciblée de gènes. Deuxièmement, un vecteur portant le gène HPV L1 a été transformé en virus compétent. H. polymorphe cellule. Enfin, nous sélectionnons le meilleur clone parmi des centaines d’options, avec une stabilité génétique et des propriétés de production élevées.
Nos caractéristiques de service
Nous avons démontré une expertise sur divers hôtes microbiens, par exemple, Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21 ; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, souche PichiaPink1/2/3/4 ; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) et Hansenula polymorpha (H. polymorpha).
Nous sommes expérimentés avec E. coli la sécrétion périplasmique, l'expression des corps solubles et d'inclusion, ainsi que l'expression intracellulaire ou de sécrétion de levure.
Nous n’ajoutons aucun antibiotique ou ajoutons les antibiotiques conformément aux directives réglementaires.
Nous établissons une plateforme de criblage à haut débit pour cribler des souches stables et hautement productives parmi plus d’une centaine de souches candidates.
Nous veillons à ce que le processus d'ingénierie et de sélection des souches soit traçable, dans le cadre d'une bonne gestion des données et des enregistrements.
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