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Servicios de preparación de proteínas sin etiquetas

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Applicación

Servicios de preparación de proteínas sin etiquetas

Las etiquetas de proteínas, como socios de fusión utilizados en tecnologías de ADN recombinante, permiten una purificación por afinidad eficaz en un solo paso para diversas proteínas/péptidos con diferentes características. A pesar de esta importante ventaja, las etiquetas como aminoácidos exógenos pueden alterar la estructura de la proteína y las funciones biológicas. Por lo tanto, las proteínas o péptidos no etiquetados (sin etiquetas) son más preferidos para garantizar la seguridad y eficacia, especialmente en el campo biofarmacéutico. Una proteína recombinante con una etiqueta de fusión tiene posibilidades limitadas de obtener autorización de las agencias de administración médica/de medicamentos.

Basada en la plataforma de investigación y desarrollo de productos biológicos microbianos, Yaohai Bio-Pharma ofrece servicios personalizados de preparación de proteínas sin etiquetas dedicados a cumplir objetivos únicos de investigación, desarrollo y fabricación para uso clínico.

Palabras clave: producción de proteínas sin etiquetas, purificación de proteínas sin etiquetas, preparación de proteínas basadas en etiquetas libres, expresión y purificación de proteínas sin etiquetas, proteína objetivo altamente libre de etiquetas Aplicación: investigación en medicina humana, desarrollo de medicina animal, desarrollo de vacunas recombinantes, molécula grande recombinante producción de biológicos


Nuestra plataforma de I+D microbiana

Tenemos experiencia en ingeniería de cepas microbianas, fermentación y purificación de productos.

Bacterias: Escherichia coli (E. coli)

Levadura: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Opciones personalizadas

ModalidadProteína recombinante
Materiales para empezarSecuencias genéticas, plásmidos recombinantes o cepas modificadas genéticamente
Lo que recibe el clientePurificar: >80%, >85%, >90% Cantidad: 0.2~10 g (a determinar por el proyecto)
Sistema de expresión y formación.E. coli secreción periplásmica, expresión de cuerpos de inclusión y solubles; Expresión intracelular o de secreción de levadura.
Métodos de análisisUltravioleta (UV), ensayo de ácido bicinconínico (BCA), Bradford o Lowry para la cantidad Electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE) para pruebas de purificación Opcional: Western blot (WB）, ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA), alto rendimiento cromatografía líquida (HPLC)
Impurezas residualesEndotoxina (opcional)

Detalles de servicios

ServiciosDetalle de ServiciosCronograma mínimo (día laborable)
Síntesis de genesOptimización de codones para un huésped de expresión específico.7 ~ 10 días
Síntesis de genes
Construcción de plásmido/vectorClonación en plásmido/vector2 días
Transformación de plásmidos
Verificación de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), digestión con enzimas de restricción, secuenciación de genes3 días
Expresión de proteínas en E. coli.Transformación de plásmidos,2 días
Cultivo en matraz agitado3 días
Fermentación en sacos de 7 litros, optimización.4 días/lote
Purificación y optimización de proteínas sin etiquetas5~10 días/lote
Pruebas mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE)
Expresión de proteínas en levadura.Preparación de células competentes de levadura. 4 días
Linealización y electrotransformación de plásmidos.
Fermentación en sacos de 7 litros, optimización. 5 días
Purificación y optimización de proteínas sin etiquetas7 días/lote
Purificación de proteínas sin etiquetas5~10 días/lote
Control de calidad por SDS-PAGE

Servicios adicionales (opcional)

Desarrollo del proceso de fermentación

Desarrollo de procesos de purificación de proteínas sin etiquetas

Ampliación piloto y fabricación GMP

Análisis y pruebas

Nuestras Características

Hemos trabajado en más de 300 cepas microbianas diseñadas, incluidas E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115; Cepa PichiaPink1/2/3/4; y H. polimorfa.

Tenemos experiencia con la secreción periplásmica de E. coli, la expresión de cuerpos solubles y de inclusión, así como la expresión intracelular o de secreción de levadura.

Establecemos una plataforma de detección de alto rendimiento para detectar cepas estables y de alta producción de más de cien cepas candidatas.

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