Síntesis de circRNA personalizada

ARN IVT

Síntesis de circRNA personalizada

El ARNm circular (circRNA) se ha utilizado ampliamente en el estudio de las funciones de genes o proteínas. Mientras tanto, es popular en el desarrollo de productos biológicos profilácticos y terapéuticos, similares al ARNm.

Yaohai Bio-Pharma ha establecido un conjunto de tecnologías de síntesis de circRNA para proporcionar ARN de alta calidad, como diseño y optimización de secuencias, transcripción in vitro (IVT), circularización/ciclación, purificación y encapsulación de nanopartículas lipídicas (LNP). Todos los productos se lanzan bajo estrictos estándares de control de calidad (QC).

Aplicaciones de ARN circular

En comparación con el ARNm lineal, el ARN circular (ARNcirc) tiene una estructura más estable y es un punto importante en la investigación actual de fármacos de ácido nucleico. Tiene una amplia gama de aplicaciones en diferentes campos, ya sea como circRNA codificante o no codificante, incluidas vacunas profilácticas para enfermedades infecciosas, vacunas oncológicas terapéuticas, fármacos oncológicos terapéuticos, terapia de reemplazo de proteínas, medicina regenerativa, terapia celular y génica (CGT). , papel de esponja molecular y aptámero de ARN.

Detalle de Servicios

Procesos	Servicio opcional	Detalle de Servicios	Plazo de entrega (día)
Diseño y optimización de secuencias de circRNA	Diseño y optimización de secuencias de codificación.	Optimización de codones CDS	1
Diseño y optimización de secuencias de circRNA	Diseño y optimización de secuencias no codificantes.	Secuencia de intrones y exones, diseño y optimización de brazos homólogos y espaciadores	1 - 2
Preparación de plásmido circular	Síntesis de genes	Síntesis de genes (de terceros)	7 - 10
	Amplificación de plásmidos	Amplificación de plásmidos	2
	Amplificación de plásmidos	Extracción de plásmido	2
Preparación de plásmido linealizado	Linealización y purificación de plásmidos.	Linealización de plásmidos	1
Preparación de plásmido linealizado	Linealización y purificación de plásmidos.	Purificación del ADN por linealización	1
Transcripción y ciclación in vitro	Transcripción y ciclación in vitro	Reacciones de transcripción y ciclación in vitro.	1 - 2
	Transcripción y ciclación in vitro	Digestión de RNasa R	1 - 2
	Optimización opcional	Composición de reacción, optimización del tiempo.	2 - 5
Purificación de ARN circular	Método de purificación convencional	Precipitación de cloruro de litio	1
	Método de purificación convencional	Purificación de perlas magnéticas	1
	Purificación de circRNA altamente pura	Cromatografía líquida preparativa de alta resolución (HPLC)	1 - 2
	Intercambio de búfer	La ultrafiltración	1
Liofilización de ARN circular	Llenado de muestra	Relleno	2 - 3
	liofilización	Precongelación
		Secado Primario (Sublimación)
		Secado Secundario (Desorción)
Encapsulación de circRNA-LNP	Encapsulación LNP	Pretratamiento de materiales y líquidos	2
	Encapsulación LNP	Mezcla de dispositivos microfluídicos	2
	Intercambio de búfer	Filtración de flujo tangencial	1
	Esterilizar	Filtración	1
Control de calidad del ADN plásmido	Concentración/pureza	Espectrofotometría ultravioleta (UV)	1 - 2
	Conformación del plásmido	Electroforesis en gel de agarosa (AGE)
	Conformación del plásmido	Electroforesis capilar (CE): opcional
	Identificar plásmido	Identificación de enzimas de restricción/EDAD
Control de calidad de circRNA	Concentración/pureza	Espectrofotometría ultravioleta (UV)	-
	Pureza	Electroforesis en gel de agarosa (AGE)/E-Gel	0.5
	Pureza	HPLC opcional	1
Control de calidad de circRNA-LNP	Eficiencia de encapsulación	Método RiboGreen	1
	Tamaño de partícula	Dispersión de luz dinámica (DLS)	1
	Índice de polidispersidad	Dispersión de luz dinámica (DLS)	1
	Potencial zeta	Dispersión de luz dinámica (DLS)	1
Ensayo de potencia basado en células	Transfección celular	Recubrimiento celular, transfección celular.	4
Ensayo de potencia basado en células	Detección de proteínas objetivo	Observación de fluorescencia, Western Blot/ELISA	1 - 3

Casos de éxito

Transfectamos ARNcirc de proteína fluorescente verde mejorado (ARNcirc de eGFP), ARNcirc de mCherry, ARNcirc de luciferasa en células 293T y detectamos la proteína objetivo a través de fluorescencia, señal luminiscente o de color, Western blot (WB) y ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA).

Ensayos de potencia basados en células de muestras de ARN circular de Yaohai Bio-Pharma

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