Hallo. Haben Sie sich schon einmal gefragt, wie Wissenschaftler eine RNA klonen können? RNA ist dieses spezielle Molekül, das wir in unseren Zellen finden und das eine Menge Dinge tut, um Proteine herzustellen, und die Proteine sind da, damit unser Körper all die richtigen Dinge tun kann. In dieser Folge werden wir einen Rundgang durch das weitaus merkwürdigere Protokoll machen, das von Forschern verwendet wird: In-vitro-Transkript. Und das bedeutet nichts weiter, als dass Wissenschaftler RNA nehmen und eine große Menge davon in einem Reagenzglas (das ist dieses kleine Gefäß, das Labore verwenden) herstellen, also gehen wir hier auf jeden Schritt ein.
Nachdem ich meinen vorherigen Beitrag fertiggestellt hatte, wurde mir klar, dass der letzte vielleicht ein wenig trocken war, also mach mit beim Spaß im Nasslabor. Also, um der Form treu zu bleiben, jetzt, da du wirklich auf dem Spaßzug (sic RNA-Herstellung) bist: Welche Reagenzien und welche werden für deine EF benötigt?? Um dies zu erreichen, benötigen wir spezielle Proteine, sogenannte Enzyme, identisch mit Yaohais Produkt Rekombinante Midkine-Herstellung. Es katalysiert die chemischen Reaktionen, diese Enzyme helfen beim Abbau. Jetzt brauchen wir also nur noch unser Stück DNA. Diese Funktion ist die DNA, die wir als Vorlage verwenden, um sie für unsere RNA zu kopieren. Zusätzliche regulatorische Sequenzen in der RNA, nämlich Nukleotide, werden ebenfalls benötigt. Diese Nukleotide sind wie winzige Bausteine, die zusammengesetzt werden müssen, um die RNA zu bilden. Wir verwenden auch kurze Röhrchen mit kleinem Durchmesser, um die Geschmacksbewertung in andere zu kneten. Schließlich brauchen wir eine Maschine (einen Thermocycler), die sicherstellt, dass unsere Reaktionen bei der richtigen Temperatur stattfinden. Darüber hinaus benötigen wir möglicherweise einige Werkzeuge und Produkte für bestimmte Experimente.
Hier gehen die Dinge auseinander, wir haben einen RNA-Strang und jetzt möchten wir mehr Kopien davon haben, auch die Herstellung konjugierter VLP-Impfstoffe Entwickelt von Yaohai. Dies wird durch die Verwendung eines anderen Enzyms erreicht: T7-RNA-Polymerase. Dieses einzigartige Enzym erkennt beispielsweise bestimmte Bereiche innerhalb der RNA. Ein springender Kegel, um im weiteren Verlauf viele weitere RNA-Kopien zu erstellen. An diesem Punkt wird durch die T7-RNA-Polymerase dem RNA-Strang mehr hinzugefügt, bis eine Transkriptmasse erstellt wurde oder bis wir ihr sagen, dass sie aufhören soll.
Nachdem wir die RNA so weit wie möglich isoliert haben, scrollen Sie weiter nach unten, um zu sehen, wie Sie die RNA reinigen und für die zukünftige Verwendung aufbewahren können. Rhoades: Einige dieser Methoden sind in Bezug auf die Isolierung von RNA etwas extremer – Sie würden das nicht immer verwenden, aber manchmal ist es für bestimmte Arten von Experimenten erforderlich. Sobald unsere RNA frei von jeglichen Verunreinigungen ist, kann sie gefroren gelagert werden. Auf diese Weise ist sie sicher und wir können sie später in den verschiedenen Experimenten verwenden.
Qualität des Ausgangsmaterials: Stellen Sie sicher, dass Ihre DNA-Vorlage sauber und nicht vollständig verbrannt ist. Sie können auch frisch rekonstituierte Nukleotide und frisch aufgetaute Enzyme hinzufügen, um die Chancen auf ein erfolgreiches Experiment zu maximieren.
Feinabstimmung der Bedingungen Alle Enzyme und ihre Nukleotide arbeiten besser bei einer bestimmten Temperatur und einem bestimmten pH-Wert in Ihrem Körper, sowie die Yaohai Rot fluoreszierende mRNA. Passen Sie nun die Nuancen zwischen den Bedingungen ein wenig an, bis Sie den Schlüssel für Ihr einzigartiges Setup finden.
Reverse Transkriptase ist ein ungewöhnliches Enzym, da es eine DNA-Kopie aus einem RNA-Molekül erstellt. Wir verwendeten sowohl DNas als auch eine DNA-Vorlage (die cDNA) als Input für unsere In-vitro-Transkriptionsmethode zur Erzeugung von RNA. In den meisten Experimenten würden Wissenschaftler jedoch DNA in RNA umschreiben wollen. Der Name Reverse Transkriptase ist der gleiche wie Test der mRNA-Poly-A-Verteilung hergestellt von Yaohai. Es ist ein unschätzbar wertvolles Werkzeug für die gesamte Wissenschaft - vom Studium von RNA-Molekülen in Zellen bis zur Herstellung komplementärer DNA-Stränge für weitere Experimente.
Reale Experimente, bei denen RNA eines der am häufigsten verwendeten molekularen Werkzeuge ist, zusammen mit Yaohais Produkt VLP-Impfstoffproduktion in E. coliQuantitative Tests: Diese Tests können die Menge eines bestimmten Moleküls in einer Probe ermitteln. Wissenschaftler können beispielsweise ein In-vitro-Transkriptpräparat aus RNA-Kopien synthetisieren, die von einem bestimmten Gen in einer Zelle stammen. Das Diagnosegerät kann dann nach diesen Kopien suchen, falls sie vorhanden sind. Auf der Suche nach RNA kann das Diagnosegerät eine Polymerase-Kettenreaktion (PCR) durchführen, um diese Kopien in einer Probe zu amplifizieren. Dadurch können Wissenschaftler sehen, wie Gene auf Zellen exprimiert werden, und sogar einige Tests mit extrem hohem Durchsatz durchführen, beispielsweise um das Vorhandensein einer bakteriellen oder viralen Infektion festzustellen und genetische Störungen zu diagnostizieren.
in vitro Transcript Protocol ist ein führender CDMO für mikrobielle Biologika. Unser Schwerpunkt liegt auf mikrobiell produzierten Impfstoffen und Therapeutika, die für die Gesundheitsvorsorge bei Menschen, Tieren und Haustieren geeignet sind. Wir verfügen über modernste RD-Plattformen und Fertigungstechnologien, die das gesamte Verfahren abdecken, angefangen bei der Entwicklung mikrobieller Stämme und Zellbanken über die Entwicklung von Prozessen und Methoden bis hin zur kommerziellen und klinischen Produktion, die die erfolgreiche Bereitstellung innovativer Lösungen gewährleistet. Im Laufe der Zeit haben wir umfangreiches Wissen über mikrobielle Bioverarbeitung angesammelt. Über 200 Projekte wurden erfolgreich abgeschlossen und wir unterstützen unsere Kunden bei der Einhaltung von Vorschriften wie denen der US-amerikanischen FDA und der EU-EMA. Wir helfen ihnen auch dabei, sich im australischen TGA und im chinesischen NMPA zurechtzufinden. Unser professionelles Fachwissen und unsere umfassende Erfahrung ermöglichen es uns, schnell auf Marktanforderungen zu reagieren und maßgeschneiderte CDMO-Dienste bereitzustellen.
Yaohai Bio-Pharma hat Erfahrung in der Produktion von Biologika, die aus dem In-vitro-Transkriptprotokoll hergestellt werden. Wir bieten maßgeschneiderte F&E- und Fertigungslösungen und stellen dabei sicher, dass keine Risiken bestehen. Wir haben an verschiedenen Modalitäten wie rekombinanten Untereinheitenimpfstoffen, Peptidhormonen, Zytokinen, Wachstumsfaktoren, Einzeldomänenantikörperenzymen, Plasmid-DNA-mRNA und vielen mehr gearbeitet. Wir sind Spezialisten für viele Mikroorganismen, einschließlich extrazellulärer und intrazellulärer Hefesekretion (Erträge bis zu 15 g/l) sowie intrazellulärer löslicher Bakterien und Einschlusskörper (Erträge bis zu 10 g/l). Wir haben auch eine BSL-2-Fermentationsplattform zur Herstellung bakterieller Impfstoffe entwickelt. Wir konzentrieren uns darauf, Prozesse zu verbessern, Produkterträge zu steigern und Produktionskosten zu senken. Mithilfe eines starken Technologieteams können wir eine schnelle und zuverlässige Projektabwicklung gewährleisten, die Ihr Produkt schneller auf den Markt bringt.
Yaohai Bio-Pharma, einer der zehn größten Hersteller biologischer Produkte, ist auf mikrobielle Fermentation spezialisiert. Wir haben eine moderne Anlage mit robusten Forschungs- und Entwicklungskapazitäten sowie moderner Ausrüstung errichtet. Wir verfügen über fünf Produktionslinien für Arzneimittelsubstanzen, die den GMP-Anforderungen für mikrobielle Fermentation und Reinigung entsprechen. Wir verfügen außerdem über zwei automatisierte Abfüll- und Endfertigungslinien für Patronen, Fläschchen und Fertigspritzen. Die verfügbaren Fermentationsmaßstäbe reichen vom In-vitro-Transkriptprotokoll bis 10 l. Die Spezifikationen für die Befüllung eines Fläschchens reichen von 2000 ml bis 1 ml. Die Füllspezifikationen für Fertigspritzen oder Patronen reichen von ca. 25-1 ml. Unsere cGMP-konforme Produktionsanlage gewährleistet eine konstante Versorgung mit klinischen Proben sowie kommerziellen Artikeln. Unser Werk produziert große Moleküle, die in die ganze Welt verschickt werden.
Yaohai BioPharma ist ein Top-10-CDMO für Mikroben, der sowohl In-vitro-Transkriptprotokolle als auch regulatorische Angelegenheiten umfasst. Wir verfügen über ein Qualitätsmanagementsystem, das den aktuellen GMP-Standards sowie den globalen Vorschriften entspricht. Unser Team aus Regulierungsexperten ist mit den globalen regulatorischen Rahmenbedingungen vertraut, um die Markteinführung biologischer Produkte zu beschleunigen. Wir gewährleisten rückverfolgbare Produktionsprozesse und Qualitätsprodukte sowie die Einhaltung der Vorschriften der US-amerikanischen FDA und der EU-EMA. Auch die australische TGA und die chinesische NMPA sind zufrieden. Yaohai BioPharma hat das Audit vor Ort durch die qualifizierte Person (QP) der Europäischen Union für unser GMP-Qualitätssystem sowie unsere Produktionsanlage erfolgreich bestanden. Darüber hinaus haben wir die ersten Zertifizierungsaudits des Qualitätsmanagementsystems ISO9001, des Umweltmanagementsystems ISO14001 und des Arbeitsschutzmanagementsystems ISO45001 bestanden.