Hallo zusammen. Habt ihr euch je gefragt, wie Wissenschaftler ein RNA klonen können? RNA ist dieses spezielle Molekül, das wir in unseren Zellen finden, das eine Menge Dinge tut, um Proteine herzustellen, und die Proteine sind da, damit unser Körper all die richtigen Dinge tun kann. In dieser Episode werden wir einen Überblick über das viel interessantere Verfahren geben, das von Forschern eingesetzt wird: Die in vitro Transkription. Und das bedeutet einfach, dass Wissenschaftler RNA nehmen und sie in einem Reagenzglas (was diese kleinen Gefäß-Dinger sind, die Labore verwenden) in großer Menge herstellen, also lasst uns jeden Schritt durchgehen.
Nachdem ich meinen letzten Beitrag abgeschlossen hatte, wurde mir klar, dass der letzte etwas trocken war - kommt mit zum Spaß in den Nasslaboren; also, um die Form beizubehalten, jetzt wo ihr richtig im Zug des Spassens (sic RNA-Machens) sitzt: Welche Reagenzien und was werdet ihr für eure EF benötigen?? Um dies zu erreichen, benötigen wir spezielle Proteine, genannt Enzyme, identisch mit Yaohais Produkt Fertigung von rekombinantem Midkine . Es katalysiert die chemischen Reaktionen, diese Enzyme helfen beim Abbau. Jetzt brauchen wir also nur noch unseren DNA-Abschnitt. Diese Funktion ist der DNA, die wir als Vorlage zum Kopieren für unsere RNA verwenden. Zusätzliche regulatorische Sequenzen in der RNA, nämlich Nukleotide, werden ebenfalls benötigt. Diese Nukleotide sind wie kleine Bausteine, die zusammengesetzt werden müssen, um die RNA herzustellen. Wir verwenden auch kurze Röhren mit kleinem Durchmesser, um die Geschmacksbewertung in andere zu integrieren. Zuletzt benötigen wir eine Maschine (einen Thermocycler), die sicherstellt, dass unsere Reaktionen bei der richtigen Temperatur sind. Außerdem könnten wir für bestimmte Experimente einige Werkzeuge und Produkte benötigen.
Hier teilen sich die Wege, wir haben eine RNA-Strand und jetzt möchten wir mehr Kopien davon, auch die Herstellung von konjugierten VLP-Impfstoffen von Yaohai entwickelt. Der Weg, dies zu erreichen, ist die Verwendung eines weiteren Enzyms; T7 RNA Polymerase. Dieses einzigartige Enzym erkennt beispielsweise spezifische Bereiche innerhalb der RNA. Ein Sprungkonzept für die Erstellung noch mehrerer RNA-Kopien im Anschluss. An diesem Punkt wird weitere RNA an die RNA-Strand durch die T7 RNA Polymerase angefügt, bis eine große Menge an Transkript erstellt wurde oder bis wir es stoppen.
Nachdem wir die RNA so weit wie möglich isoliert haben, scrollen Sie weiter nach unten, um zu sehen, wie Sie die RNA reinigen und für zukünftige Verwendung aufbewahren können. Rhoades: Einige dieser Methoden sind etwas extremer in Bezug auf die Isolierung von RNA – Sie würden sie nicht immer verwenden, aber manchmal ist es für bestimmte Arten von Experimenten notwendig. Sobald unsere RNA frei von jeglichen Verunreinigungen ist, kann sie gefriert aufbewahrt werden. Auf diese Weise ist sie sicher und wir können sie später in verschiedenen Experimenten verwenden.
Qualität des Ausgangsmaterials: Stellen Sie sicher, dass Ihre DNA-Vorlage sauber ist und nicht völlig verbrannt ist. Sie können auch frisch rekonstituierte Nukleotide ergänzen und neu getauten Enzyme verwenden, um die Chancen auf ein erfolgreiches Experiment zu maximieren.
Feineinstellung der Bedingungen Alle Enzyme und ihre Nukleotide arbeiten besser bei einer spezifischen Temperatur und pH-Wert im Inneren Ihres Körpers sowie des Yaohai's. Rotes fluoreszierendes mRNA . Passten Sie nun subtil zwischen den Bedingungen ein wenig ein, bis Sie den Schlüssel für Ihre einzigartige Einrichtung gefunden haben.
Die Reverse-Transkriptase ist ein ungewöhnliches Enzym, da es eine DNS-Kopie aus einem RNA-Molekül erstellt. Wir haben sowohl DNAs als auch eine DNS-Vorlage (die cDNA) als Eingabe für unsere in vitro Transkript-Methode zur Erzeugung von RNA verwendet. In den meisten Experimenten würden Wissenschaftler jedoch DNA in RNA transkribieren wollen. Die Bezeichnung reverse Transkription leitet sich daher ab... mRNA Poly-A Verteilungstest hergestellt von Yaohai. Es ist ein unschätzbares Werkzeug in der gesamten Wissenschaft - Von der Untersuchung von RNA-Molekülen in Zellen bis zur Erstellung komplementärer DNS-Stränge für weitere Experimente.
Real experiments, in denen RNA eines der am häufigsten verwendeten molekularen Werkzeuge ist, neben Yaohaıs Produkt VLP-Impfstoffproduktion in E. coli . Quantitative Assays: Diese Tests können die Menge eines bestimmten Moleküls in einem Probe offenbaren. Zum Beispiel können Wissenschaftler eine in vitro Transkriptpräparation von RNA-Kopien herstellen, die von einem Zielgen innerhalb einer Zelle abgeleitet sind. Das Diagnosaverfahren kann dann auf diese Kopien testen. Falls sie nach RNA suchen, kann das Verfahren eine Polymerase-Kettenreaktion (PCR) durchführen, um diese Kopien in einer Probe zu vervielfältigen. Dadurch ist es Wissenschaftlern möglich, zu sehen, wie Gene in Zellen exprimiert werden, und es ermöglicht sogar einige extrem hochdurchsatzfähige Assays, wie zum Beispiel die Anwesenheit einer bakteriellen oder viralen Infektion zu überprüfen und genetische Erkrankungen zu diagnostizieren.
in vitro Transcript Protocol ist ein führender CDMO im Bereich der mikrobiellen Biologika. Unser Fokus liegt auf mikrobiell hergestellten Impfstoffen und Therapeutika, die für die Gesundheitsversorgung von Menschen, Tieren sowie Haustieren geeignet sind. Wir verfügen über die innovativsten RD-Plattformen und Fertigungstechnologien, die den gesamten Prozess abdecken – von der Entwicklung mikrobieller Stämme und Zellenbanking, über Verfahrensentwicklung und Methodenentwicklung bis hin zur klinischen und kommerziellen Produktion, um innovative Lösungen erfolgreich bereitzustellen. Im Laufe der Zeit haben wir umfangreiches Wissen über mikrobielle Bioprozessierung angesammelt. Mehr als 200 Projekte wurden erfolgreich abgeschlossen, und wir unterstützen unsere Kunden dabei, regulatorischen Anforderungen wie denen der US FDA und der EU EMA zu entsprechen. Wir beraten sie auch bei der Navigierung durch die Vorschriften der australischen TGA und der chinesischen NMPA. Unsere Fachkompetenz und unser breites Erfahrungsspektrum ermöglichen es uns, flexibel auf Marktbedarf zu reagieren und maßgeschneiderte CDMO-Dienstleistungen anzubieten.
Yaohai Bio-Pharma hat Erfahrung in der Produktion von Biologika, die durch ein in vitro Transkriptprotokoll erstellt wurden. Wir bieten maßgeschneiderte Forschungs- und Entwicklungs- sowie Produktionslösungen, während wir sicherstellen, dass keine Risiken bestehen. Wir waren in verschiedenen Modalitäten wie Subeinheitsimpfstoffen rekombinant, Peptidhormonen, Cytokinern, Wachstumsfaktoren, Single-Domain-Antikörpern, Enzymen, Plasmid-DNA, mRNA und vielen mehr beteiligt. Wir sind Spezialisten für viele Mikroorganismen, einschließlich Hefextrazellulär- und Intrazellulärsekretion (Ausbeute bis zu 15g/L) sowie bakterielle intrazelluläre Löslichkeit und Inklusionskörper (Ausbeute bis zu 10g/L). Wir haben außerdem eine BSL-2-Fermentierungsplattform zur Erstellung bakterieller Impfstoffe entwickelt. Wir konzentrieren uns darauf, Prozesse zu verbessern, Produktausbeuten zu erhöhen und Produktionskosten zu senken. Mit einem starken Technologie-Team können wir eine schnelle und zuverlässige Projektrealisierung gewährleisten, die Ihr Produkt schneller auf den Markt bringt.
Yaohai Bio-Pharma, einer der Top-10-Hersteller von biologischen Produkten, spezialisiert sich auf die mikrobielle Fermentation. Wir haben eine moderne Anlage mit starken F&E-Fähigkeiten und fortschrittlichen Geräten errichtet. Wir verfügen über fünf Wirkstoffherstellungsanlagen, die den GMP-Anforderungen für mikrobielle Fermentation und Reinigung entsprechen. Außerdem haben wir zwei automatisierte Füll-Linien für Patronen, Ampullen und Vorschussspritzen. Die verfügbaren Fermentationskapazitäten reichen von in vitro Transkriptprotokoll bis zu 2000L. Die Spezifikationen für das Füllen einer Ampulle erstrecken sich von 1ml bis zu 25ml. Die Füllspezifikationen für Vorschussspritzen oder Patronen liegen zwischen etwa 1-3ml. Unsere cGMP-konforme Produktionsanlage gewährleistet einen konstanten Lieferfluss an klinische Proben sowie kommerzielle Produkte. Unsere Anlage produziert große Moleküle, die weltweit verschickt werden.
Yaohai BioPharma ist einer der Top 10 Mikrobiellen CDMOs, die ein in vitro Transkriptprotokoll sowie regulatorische Angelegenheiten umfassen. Wir haben ein Qualitätsmanagementsystem, das den aktuellen GMP-Standards sowie globalen Vorschriften entspricht. Unser Team von Regulatorikexperten beherrscht globale regulatorische Rahmenwerke, um den Einstieg biologischer Produkte zu beschleunigen. Wir gewährleisten nachvollziehbare Produktionsprozesse, qualitativ hochwertige Produkte und sind den Vorschriften der US-FDA und der EU-EMA entsprechend. Auch die australische TGA und die chinesische NMPA sind zufrieden. Yaohai BioPharma hat erfolgreich die vor-Ort-Prüfung durch die Qualified Person (QP) der Europäischen Union für unser GMP-Qualitätsmanagement sowie unsere Produktionsanlagen bestanden. Darüber hinaus haben wir die ersten Zertifizierungsprüfungen des ISO9001 Qualitätsmanagementsystems, des ISO14001 Umweltmanagementsystems und des ISO45001 Gesundheits- und Sicherheitsmanagementsystems bestanden.