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In vitro Transkriptprotokoll

Hallo zusammen. Habt ihr euch je gefragt, wie Wissenschaftler ein RNA klonen können? RNA ist dieses spezielle Molekül, das wir in unseren Zellen finden, das eine Menge Dinge tut, um Proteine herzustellen, und die Proteine sind da, damit unser Körper all die richtigen Dinge tun kann. In dieser Episode werden wir einen Überblick über das viel interessantere Verfahren geben, das von Forschern eingesetzt wird: Die in vitro Transkription. Und das bedeutet einfach, dass Wissenschaftler RNA nehmen und sie in einem Reagenzglas (was diese kleinen Gefäß-Dinger sind, die Labore verwenden) in großer Menge herstellen, also lasst uns jeden Schritt durchgehen.

Nachdem ich meinen letzten Beitrag abgeschlossen hatte, wurde mir klar, dass der letzte etwas trocken war - kommt mit zum Spaß in den Nasslaboren; also, um die Form beizubehalten, jetzt wo ihr richtig im Zug des Spassens (sic RNA-Machens) sitzt: Welche Reagenzien und was werdet ihr für eure EF benötigen?? Um dies zu erreichen, benötigen wir spezielle Proteine, genannt Enzyme, identisch mit Yaohais Produkt Fertigung von rekombinantem Midkine . Es katalysiert die chemischen Reaktionen, diese Enzyme helfen beim Abbau. Jetzt brauchen wir also nur noch unseren DNA-Abschnitt. Diese Funktion ist der DNA, die wir als Vorlage zum Kopieren für unsere RNA verwenden. Zusätzliche regulatorische Sequenzen in der RNA, nämlich Nukleotide, werden ebenfalls benötigt. Diese Nukleotide sind wie kleine Bausteine, die zusammengesetzt werden müssen, um die RNA herzustellen. Wir verwenden auch kurze Röhren mit kleinem Durchmesser, um die Geschmacksbewertung in andere zu integrieren. Zuletzt benötigen wir eine Maschine (einen Thermocycler), die sicherstellt, dass unsere Reaktionen bei der richtigen Temperatur sind. Außerdem könnten wir für bestimmte Experimente einige Werkzeuge und Produkte benötigen.

Maximierung von Ausbeute und Reinheit bei in vitro Transkript-Prozeduren

Hier teilen sich die Wege, wir haben eine RNA-Strand und jetzt möchten wir mehr Kopien davon, auch die Herstellung von konjugierten VLP-Impfstoffen von Yaohai entwickelt. Der Weg, dies zu erreichen, ist die Verwendung eines weiteren Enzyms; T7 RNA Polymerase. Dieses einzigartige Enzym erkennt beispielsweise spezifische Bereiche innerhalb der RNA. Ein Sprungkonzept für die Erstellung noch mehrerer RNA-Kopien im Anschluss. An diesem Punkt wird weitere RNA an die RNA-Strand durch die T7 RNA Polymerase angefügt, bis eine große Menge an Transkript erstellt wurde oder bis wir es stoppen.

Nachdem wir die RNA so weit wie möglich isoliert haben, scrollen Sie weiter nach unten, um zu sehen, wie Sie die RNA reinigen und für zukünftige Verwendung aufbewahren können. Rhoades: Einige dieser Methoden sind etwas extremer in Bezug auf die Isolierung von RNA – Sie würden sie nicht immer verwenden, aber manchmal ist es für bestimmte Arten von Experimenten notwendig. Sobald unsere RNA frei von jeglichen Verunreinigungen ist, kann sie gefriert aufbewahrt werden. Auf diese Weise ist sie sicher und wir können sie später in verschiedenen Experimenten verwenden.

Why choose Yaohai In vitro Transkriptprotokoll?

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