Po osrednji dogmi je messenger RNA (mRNA) most za prenos genetskega materiala iz DNK na proteine.
mRNA igra biološko vlogo s kodiranjem proteinov in vivo, zrela mRNA v evkariontskih organizmih pa je sestavljena iz petih komponent: 5' Cap (struktura kapice), 5' UTR (nekodirajoče območje), ORF (odprt bralni okvir), 3' UTR in 3' poliA rep (poliadenilatni rep).
Storitve Podrobnosti
| Proces | Izbirna storitev | Podrobnosti o storitvi | Dobavni rok (dan) |
| Oblikovanje in optimizacija zaporedja mRNA | Oblikovanje in optimizacija kodirnih sekvenc | Poravnava zaporedja CDS Optimizacija CDS kodona | 1 |
| Oblikovanje in optimizacija nekodirajočih zaporedij | Oblikovanje in optimizacija zaporedja 5' UTR Oblikovanje in optimizacija zaporedja 3' UTR oblikovanje in optimizacija zaporedja polyA | 1-2 |
Prilagodljive možnosti
| 5' UTR/3' UTR | - Zaporedje Nature UTR
- Mutant/skonstruirano UTR zaporedje
|
| 3' PolyA rep | - 100A ~120A rep (priporočeno)
- Segmentiran poliA rep
- Drugi rep po meri
|
Skupne strategije za načrtovanje zaporedja mRNA
| Komponente mRNA | Biološke funkcije | Optimizacijske strategije |
| 5' Cap | Zaščiti mRNA pred razgradnjo z eksonukleazami in deluje usklajeno s poliA repom na 3' koncu, poliA vezavnim proteinom in proteinom faktorja iniciacije prevajanja, da sproži prevajanje proteina. | Naravna struktura Cap1 se izogiba receptorjem za prepoznavanje vzorcev in tako zmanjša naravni imunski odziv, kar je mogoče doseči z enostopenjskim kotranskripcijskim omejevanjem ali dvostopenjskim encimskim omejevanjem [za podrobnosti glejte encimsko omejevanje mRNA in sotranskripcijsko omejevanje]. |
| 5' UTR | 5' UTR lahko prepoznajo ribosomi, uravnava prevajanje mRNA in vpliva na stabilnost mRNA. | Vsebujejo Kozakova zaporedja brez zelo stabilne sekundarne strukture. Za in vitro transkripcijske (IVT) mRNA, kot sta α-globin in β-globin, so prednostni naravni UTR-ji visoko izraženih genov. |
| CDS | Regije, ki kodirajo proteine, in kodirne sekvence za antigene, protitelesa ali druge funkcionalne proteine. | Optimizacija kodona poveča stopnjo prevajanja, pri čemer je treba upoštevati, da lahko nekateri neoptimalni kodoni igrajo vlogo pri zvijanju beljakovin. |
| 3' UTR | Uravnava prevajanje in stabilnost mRNA. | Za IVT mRNA, kot sta α-globin in β-globin, so prednostni naravni UTR-ji visoko izraženih genov. |
| 3' polyA rep | Uravnava izražanje beljakovin in ščiti strukturo kapice pred razgradnjo. | Zahtevana je ustrezna dolžina (100-150 bp); kodiranje poliA repa na plazmidu transkripcijske predloge zagotavlja bolj definirano dolžino repa poliA. |
Naše lastnosti
Več virov visoko izraženih naravnih in spremenjenih knjižnic UTR; zrela strategija spreminjanja UTR;
- Vrhunska ekipa za optimizacijo CDS
Sodelujte s strokovno ekipo algoritmov AI, da dokončate optimizacijo kodonov.
- Enakomerna poliA porazdelitev repa
Za natančnejši nadzor dolžine mRNA dodajte zaporedja poliA glede na predloge DNK.
- Raznolike kombinacije optimizacije
Doseči učinkovito izražanje mRNA z nizko imunogenostjo.
Študija primera
Zasnova zaporedja dvojne reporterske mRNA: mRNA mCherry-eGFP
Storitev mRNA podjetja Yaohai Bio-Pharma še naprej nadgrajuje z zasnovo in optimizacijo tandemskega zaporedja dvojnega reporterskega gena, ki dosega soizražanje dvojnih genov.
Z uporabo običajnega transfekcijskega reagenta se dvojno gensko tandemsko zaporedje mCherry-eGFP mRNA transfecira v celice 293T in dva fluorescentna signala mCherry (rdeč) in izboljšanega zelenega fluorescentnega proteina (eGFP) se zaznata s hkratno ekspresijo po 48 urah in zloženi graf je označen z rumeno.
Izražanje mRNA mCherry-eGFP v celici 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
