V procesu priprave in vitro transkripcijske (IVT) mRNA je potrebna linearizirana plazmidna DNA kot transkripcijska predloga za IVT s pomočjo polimeraze T7 RNA. Visokokakovostna plazmidna DNA je ključnega pomena za transkripcijo in vitro.
Na podlagi zrele storitvene platforme za pripravo plazmidov lahko Yaohai Bio-Pharma ponudi linearizirano storitev priprave plazmidne DNK visoke čistosti in visokega standarda za doseganje učinkovite transkripcije IVT.
Storitve Podrobnosti
| Proces | Izbirna storitev | Podrobnosti o storitvi | Dobavni rok (delovnik) |
| Priprava krožnega plazmida | Genska sinteza | Genska sinteza (tretja oseba) | 7-10 |
| Plazmidno pomnoževanje | Plazmidno pomnoževanje | 2 |
| Ekstrakcija plazmidov |
| Linearizirana priprava plazmida | Linearizacija in čiščenje plazmidov | Linearizacija plazmidov | 1 |
| Linearizacijsko čiščenje DNK |
| Kontrola kakovosti plazmidne DNA | Čistost koncentracije | Ultravijolična (UV) spektrofotometrija | 1-2 |
| Plazmidna konformacija | Elektroforeza v agaroznem gelu (AGE) |
| Kapilarna elektroforeza (CE) - neobvezno |
| Identifikacija plazmida | Identifikacija restrikcijskega encima/AGE |
Naše lastnosti
Fleksibilna izbira metod linearizacije
Optimizacija metod ekstrakcije in čiščenja DNK za doseganje visokih stopenj predelave.
Strogi standardi nadzora procesov s stopnjo superhelične konformacije vzorcev plazmidov za raziskave nad 80 %.
Visok standard in visoko učinkovita priprava plazmidov ter storitve nadzora kakovosti za izpolnjevanje eksperimentalnih potreb.
Študija primera
Če za primer vzamemo izdelek mRNA_luciferaze iz kataloga Yaohai Bio-Pharma, ima vzorec plazmida transkripcijske predloge (raziskovalne stopnje) superhelično razmerje več kot 90 %, linearizacijsko razmerje blizu 100 % in kasnejše transkripcijsko razmerje do 1:200 ( linearizirana plazmidna DNA:mRNA).
MRNA_luciferaza, pridobljena s pripravo lineariziranega plazmida kot matrice, se transfektira v celice 293T in 24 ur po transfekciji se oceni aktivnost reakcije encim-substrat.
Zaznati je mogoče očiten močan signal aktivnosti luciferaze, tj. protein luciferaze se učinkovito izraža, kar nakazuje, da lahko čistost transkripcijske predloge v celoti zadosti zahtevi po visokokakovostni pripravi mRNA.
Test razmerja superzvitega plazmida
Validacija ekspresije mRNA luciferaze in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
