V procesu priprave mRNA po transkripciji in vitro (IVT) je potreben linearni plazmidni DNA kot transkripcijski predložek za IVT z uporabo T7 RNA polimeraze. Visokokakovostni plazmidni DNA so ključni za transkripcijo in vitro.
Na osnovi zrelega platforme za storitve priprave plazmidov lahko Yaohai Bio-Pharma ponudi storitev visokega standarda in čistoči priprave linearnega plazmidnega DNA za učinkovito transkripcijo IVT.
Podrobnosti storitev
| Proces |
Izbirne storitve |
Podrobnosti storitev |
Doba dostave (delovni dan) |
| Priprava krožnih plazmidov |
Sinteza gena |
Sintetizacija genov (tretja stran) |
7-10 |
| Amplifikacija plazmida |
Amplifikacija plazmida |
2 |
| Ekstrakcija plazmida |
| Priprava linearnega plazmida |
Linearnizacija in očiščanje plazmidne DNA |
Linearnizacija plazmida |
1 |
| Očiščenje linearnega DNA-ja |
| Kontrola kakovosti plazmidnega DNA-ja |
Koncentracija in čistota |
Ultravijolična (UV) spektrofotometrija |
1-2 |
| Plazmidna konformacija |
Elektroforeza v agarosovem gelu (AGE) |
| Kapilarna elektroforeza (CE) - izbirno |
| Identifikacija plazmida |
Identifikacija omejitovalnih enzimov / AGE |
Naše značilnosti
- Prosto sčitljiv predloga plazmida
Pogostost izbire metode linearizacije
- Visoka hitrost razredne obnovitve
Optimizacija metod izvlečanja in očiščenja DNA za dosego visokih obnovitvenih tehnik.
- Strogi krmilni sistem kakovosti
Strogost standardov nadzora procesa, z merilo superhelikalne konformacije plazmidnih vzorcev za raziskave presegajočega 80%.
Visoki standard in učinkovite storitve pri pripravi in kakovostnem nadzoru plazmidov za izpolnitev potreb eksperimenta.
Studija primerov
S primero izdelka mRNA_luciferase iz kataloga Yaohai Bio-Pharma: transkripcija predložnega plazmida (raziskovalna stopnja) ima merilo superhelikse večje od 90%, linearno merilo blizu 100% ter slednje merilo transkripcije do 1:200 (linearni plazmidni DNA:mRNA).
MRNA_luciferase, pridobljena s pripravo linearnega plazmida kot predloga, se transficira v 293T celice, in aktivnost enzim-substratne reakcije se oceni 24 ure po transfekciji.
Je zaznamljiv jasen signal močne luciferaze aktivnosti, kar pomeni, da je luciferaza proteina učinkovito izražena, kar nakazuje, da lahko čistota transkripcijskega predloga popolnoma zadovolji zahteve za pripravo visokokakovostnega mRNA.
Test razmerja superzavijenega plazmida
Potrditev izražanja mRNA luciferaze in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
