Priprava CircRNA zahteva linearno RNA kot predhodnik (RNA predhodnik) za ciklizacijo, kjer je predhodnik RNA običajno pripravljen z uporabo lineariziranega plazmidnega DNA kot transkripcijskega predložka in transkribiran v laboratoriju z pomočjo T7 RNA polimeraze.
Visokokakovostni plazmidni DNA je ključen za transkripcijo v laboratoriju (IVT). Na osnovi zrele platforme za storitve priprave plazmidov lahko Yaohai Bio-Pharma ponudi storitev visoke čistoči in standardne priprave lineariziranega plazmidnega DNA (pDNA), da se zagotovi celovitost IVT izdelkov.
Podrobnosti storitev
| Proces |
Izbirne storitve |
Podrobnosti storitev |
Doba dostave (delovni dan) |
| Priprava krožnih plazmidov |
Sinteza gena |
Sintetizacija genov (tretja stran) |
7-10 |
| Amplifikacija plazmida |
Amplifikacija plazmida |
2 |
| Ekstrakcija plazmida |
| Priprava linearnega plazmida |
Linearnizacija in očiščanje plazmidne DNA |
Linearnizacija plazmida |
1 |
| Očiščenje linearnega DNA-ja |
| Kontrola kakovosti plazmidnega DNA-ja |
Koncentracija in čistota |
Ultravijolična (UV) spektrofotometrija |
1-2 |
| Plazmidna konformacija |
Elektroforeza v agarosovem gelu (AGE) |
| Kapilarna elektroforeza (CE) - izbirno |
| Identifikacija plazmida |
Identifikacija omejitovalnih enzimov / AGE |
Naše značilnosti
- Prosto sčitljiv predloga plazmida
Pogostost izbire metode linearizacije
- Visoka hitrost razredne obnovitve
Optimizacija metod izvlečanja in očiščenja DNA za dosego visokih obnovitvenih tehnik.
- Strogi krmilni sistem kakovosti
Strogost standardov nadzora procesa, z merilo superhelikalne konformacije plazmidnih vzorcev za raziskave presegajočega 80%.
Visoki standard in učinkovite storitve pri pripravi in kakovostnem nadzoru plazmidov za izpolnitev potreb eksperimenta.
Studija primerov
S primerom produkta Yaohai Bio-Pharma, mCherry circRNA, je razmerje superzavijenih vzorcev transkripcije plazmidnega vzorca (raziskovalna stopnja) več kot 70 %, z linearnostjo skoraj 100 %.
mCherry circRNA je pripravljena s linearnim plazmidom kot s predlogom in transficirana v 293T celice. Po 24 urah transfikacije se zaznamo visoko izraženo fluoresenco (rdeča fluoresenca), ki se po 48 urah poveča in jo še vedno zaznamo sedmem in četrtem danu po transfikaciji.
mCherry beljak je stabilno in učinkovito izražen, pri čemer je čisto oblikovan predlog zahteval glede na zahteve krožne RNA farmacevtskega produkta (DP) visoke kakovosti.
Dokaz izražanja mCherry circRNA v vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
