Pomen analize moči mRNA
Z hitrim razvojem cebelovih cepljenj in terapij je potreben določen nabor metod za analizo, da se preveri moč (določanje njihove biološke aktivnosti), ki vključuje učinkovitost prevajanja mRNA. Te metode so tipično temeljijo na celični transfekciji in funkcionalnih analizah ciljnega proteina.
Yaohai Bio-Pharma ponuja celične analize moči za farmacevtske snovi mRNA ali LNP produkte, vsebine celične transfekcije (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 celice itd.) in ELISA ali zapisne analize (WB).
Uredbena zahtevanja za analize moči
Po razmislekih WHO o regulativnih vprašanjih: "Moč vsake serie končne cepiva naj bi se določila z ustreznim količinskim in validiranim funkcionalnim metodo(s). Potencialni v laboratoriju izvedeni testi moči lahko vključujejo transfekcijske sisteme na osnovi celic ali testiranje brez celic." In USP priporoča "transfekcijski sistem na osnovi celic" za testiranje moči mRNA, torej, izraz ciljnega proteina.
Postopek
Korak 1. Transfekcija na osnovi celic s mRNA ali mRNA-LNP
Celice so kultivirane in transficirane z mRNA ali mRNA-LNP. Podrobneje, mRNA je transficirana po tem, ko je bila zmiješana z transfekcijskim sredstvom, medtem ko je mRNA-LNP direktno transficiran v celice. Po 24-48 urah odčistite supernatant, ki vsebuje izražen proteин, s centrifugacijo.
Korak 2. Funkcionalni testi ciljnega proteina
Izvedite ELISA ali WB analize, da ocenite funkcionalno vezovanje ciljnih белkين.
Studija primerov
Celinske analize moči vzorcev mRNA
Yaohai-BioPharma je razvil metodo celinske analize moči za mRNA, ki vključuje kultiviranje celic, transfekcijo celic in funkcionalne analize beljakovin. Transfekirali smo eGFP mRNA, mCherry mRNA, luciferaza mRNA, spike protein mRNA v 293T celice in smo odkrili ciljne beletrine preko fluorescenčnega, luminescenčnega ali barvnega signala, WB, ELISA.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
