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Ingegneria del Ceppo

Ingegneria del Ceppo

L'Importanza dell'Ingegneria del Ceppo

L'ingegneria del ceppo mira a dotare il substrato di espressione delle caratteristiche desiderate, il che è fondamentale per lo sviluppo CMC dei biologici e determina la qualità e la coerenza del prodotto e del processo produttivo.

Parole chiave: ingegneria genetica del ceppo e screening, costruzione di ceppi per l'espressione proteica, ingegneria cellulare microbica, ingegneria del ceppo batterico, ingegneria del ceppo lievitico, costruzione di microbi prokarioti, ingegneria di microbi eucarioti, ceppi ingegnerizzati

Applicazioni: medicina umana, medicina veterinaria, vaccini, biologia sintetica, biologici molecolari ricombinanti, reagenti biologici

Servizi di Ingegneria del Ceppo di Yaohai Bio-Pharma

Grazie a più di 10 anni di esperienza nel CDMO nei biologici microbici, abbiamo accumulato una ricca esperienza nell'ingegnerizzazione e nella selezione di vari tipi di vettori plasmidici e di ospiti microbici (batteri, lieviti). Possiamo trovare il miglior sistema di espressione per i tuoi biologici unici.

Abbiamo raccolto vari ospiti microbici con fonti chiare e CoA standard, inclusi

Batteri: Escherichia coli (E. coli)

Lievi: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorfa)

Dettagli del servizio

Servizi

Dettagli del servizio

Minimo tempo di esecuzione/Giorno

Consegne

Ingegneria del Ceppo

Knock-out genico o eliminazione genica

DA DEFINIRE

Relazione di ingegneria dei ceppi

Inserimento genico, o Inserimento di un gene

Costruzione del ceppo ( E. coli )

Trasformazione plasmidica (multi-ospiti)

5

COA degli ospiti commerciali,

Relazione sulla costruzione del ceppo

Verifica con PCR

Purificazione del ceppo

Conservazione del ceppo

Costruzione del ceppo (Lievitazione)

Preparazione di cellule lievitanti competenti

10

Linearizzazione del plasmide

Elettrotrasformazione

Screening della resistenza\/deficienza nutrizionale

Purificazione del ceppo

Conservazione del ceppo

Screening del ceppo ospite adatto

Estrazione di DNA plasmidico o genomico

15-20

Processo di schermatura dell'ospite,

Report di test delle ceppi ingegnerizzati

Verifica PCR, digestione con enzimi di restrizione

Sequencing del Gene Obiettivo

Screening degli ospiti ad alta espressione

Screening degli ospiti con stabilità genetica

Conservazione del ceppo

Studio di caso

Hansenula polymorpha ingegnerizzata migliorata ha migliorato il rendimento dell'espressione dei VLP HPV L1.  

Abbiamo sviluppato lieviti Hansenula polymorpha (H. polymorpha) piattaforma di ingegnerizzazione e screening per l'espressione di proteine/peptidi ricombinanti. Innanzitutto, abbiamo generato H. polymorpha ceppi con deficienza di proteasi attraverso l'eliminazione genica mirata. In secondo luogo, un vettore portante il gene HPV L1 è stato trasformato nelle cellule competenti. H. polymorpha cella. Infine, selezioniamo il clone migliore tra centinaia di opzioni, con stabilità genetica e proprietà ad alta produzione.

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Le Caratteristiche del Nostro Servizio

Abbiamo dimostrato competenza in vari ospiti microbici, ad esempio, Escherichia coli (E. coli)  DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) e Hansenula polymorpha (H. polymorpha) .

Siamo esperti in E. coli secrezione periplasmatica, espressione solubile e corpo di inclusione, nonché espressione intracellulare o di secrezione nei lieviti.

Non aggiungiamo antibiotici oppure li utilizziamo in conformità con le linee guida normative.

Stabiliamo una piattaforma di screening ad alta velocità per selezionare ceppi ad alta produzione e stabili tra più di cento ceppi candidati.

Ci assicuriamo che il processo di ingegnerizzazione e screening dei ceppi sia tracciabile, in conformità con la Buona Gestione dei Dati e dei Record.

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