تعیین وزن مولکولی توسط LC-MS
وزن مولکولی دست نخورده همیشه به عنوان یک ویژگی مهم بیولوژیک شناخته شده است. تجزیه و تحلیل وزن مولکولی دست نخورده برای نشان دادن محصولات پروتئین / پپتید و تأیید بیولوژیک استفاده می شود. اندازه گیری وزن مولکول از الزامات دستورالعمل های نظارتی است.
Yaohai Bio-Pharma تجزیه و تحلیل وزن مولکولی دست نخورده را تحت شرایط بومی، کاهش یافته و N-deglycosylated ارائه می دهد. ما از کروماتوگرافی مایع - طیف سنجی جرمی (LC-MS) برای تعیین وزن مولکولی دست نخورده استفاده می کنیم.
الزامات تنظیمی برای وزن مولکولی
در ICH Q6 توصیه می شود که "وزن (یا اندازه) مولکولی با استفاده از کروماتوگرافی حذف اندازه، الکتروفورز ژل SDS-پلی آکریل آمید (در شرایط کاهنده و غیر احیا کننده)، طیف سنجی جرمی (MS) و سایر تکنیک های مناسب تعیین شود.
روش های تحلیلی
| تحلیل و بررسی |
مواد و روش ها |
| وزن مولکولی |
LC-MS / کروماتوگرافی مایع / طیف سنجی جرمی الکترواسپری (LC/ES-MS) از پروتئین های بومی، احیا شده، N-دگلیکوزیله یا زیر واحد |
رویه های تحلیلی
وزن مولکولی دست نخورده:
- انجام LC-MS بر روی نمونه بومی همانطور که دریافت شد.
- تجزیه و تحلیل داده های LC-MS.
کاهش وزن مولکولی:
- درمان نمونه پروتئین با یک عامل کاهنده مناسب.
- انجام LC-MS بر روی پروتئین کاهش یافته.
- تجزیه و تحلیل داده های LC-MS.
وزن مولکولی N-دگلیکوزیله:
- حذف N-گلیکان ها با یک آنزیم مناسب.
- انجام LC-MS بر روی پروتئین N-deglycosylated.
- تجزیه و تحلیل داده های LC-MS.
وزن مولکولی کاهش یافته و N-دگلیکوزیله:
- درمان نمونه پروتئین با یک عامل کاهنده مناسب.
- حذف N-گلیکان ها با یک آنزیم مناسب.
- انجام LC -MS بر روی پروتئین کاهش یافته و N-deglycosylated.
- تجزیه و تحلیل داده های LC-MS.
وزن مولکولی زیر واحد پروتئین:
- برش زیر واحد
- انجام LC-MS بر روی زیر واحد پروتئین
- تجزیه و تحلیل داده های LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
نه
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
