تعیین وزن مولکولی با LC-MS
وزن مولکولی کامل همواره به عنوان یک ویژگی مهم محصولات زیستی شناخته شده است. تحلیل وزن مولکولی کامل برای نشان دادن محصولات پروتئین/پپتید و تایید محصولات زیستی استفاده می‌شود. اندازه‌گیری وزن مولکولی یکی از الزامات راهنمای تنظیمی است.
Yaohai Bio-Pharma تجزیه و تحلیل وزن مولکولی کامل را در شرایط اصلی، کاهش یافته و بدون نیتروزاسیون N ارائه می‌دهد. ما از کروماتوگرافی مایع-طیف سنجی جرمی (LC-MS) برای تعیین وزن مولکولی کامل استفاده می‌کنیم.
الزامات تنظیمی برای وزن مولکولی
در ICH Q6 پیشنهاد شده است که «وزن مولکولی (یا اندازه) با استفاده از کروماتوگرافی جداکنندگی حجم، الکتروفورز ژل پلی آکریلامید SDS (در شرایط کاهش یافته و غیرکاهش یافته)، طیف سنجی جرمی (MS) و سایر تکنیک‌های مناسب تعیین می‌شود».
روش‌های آنالیز
| تحلیل |
روش‌ها |
| وزن مولی |
LC-MS / کروماتوگرافی مایع/مس طیف‌سنجی با الکترود اسپری (LC/ES-MS) برای پروتئین‌های اصلی، تقلیل یافته، و N-دیگلیکوزیله شده یا واحد‌های زیر |
رویه‌های تحلیلی
وزن مولکولی کامل:
- اجرا کردن LC-MS روی نمونه اصلی به صورت دریافتی.
- تحلیل داده‌های LC-MS.
وزن مولکولی تقلیل یافته:
- درمان نمونه پروتئین با عامل مناسب برای تقلیل;
- اجرا کردن LC-MS روی پروتئین تقلیل یافته;
- تحلیل داده‌های LC-MS.
وزن مولکولی N-دیگلیکوزیله شده:
- حذف N-گلیکان‌ها با آنزیم مناسب;
- اجرا کردن LC-MS بر روی پروتئین N-دگلیکوزیله شده;
- تحلیل داده‌های LC-MS.
وزن مولکولی کاهش یافته و N-دگلیکوزیله شده:
- درمان نمونه پروتئین با عامل مناسب برای تقلیل;
- حذف N-گلیکان‌ها با آنزیم مناسب;
- اجرا کردن LC-MS بر روی پروتئین کاهش یافته و N-دگلیکوزیله شده;
- تحلیل داده‌های LC-MS.
وزن مولکولی زیرواحد پروتئین:
- بریدگی زیرواحد
- اجرا کردن LC-MS بر روی زیرواحد پروتئین
- تحلیل داده‌های LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
