پروفایل‌سازی N-گلیکان برای تولید داروهای زیستی اهمیت دارد. Yaohai Bio-Pharma خدمات پروفایل‌سازی N-گلیکان را با استفاده از کروماتوگرافی مایع-طیف‌سنجی جرمی (LC-MS) از گلیکان‌های آزاد و نشانه‌گذاری‌شده ارائه می‌دهد. مراحل کلی برای آماده‌سازی نمونه N-گلیکان شامل هضم پروتئین گلیکوزیله (GP)، حذف گلیکوزیلاسیون، تصفیه، نشانه‌گذاری/مشتق‌زنی و استخراج فاز جامد (SPE) است.
ما در توصیف ساختار پروتئین‌های مختلف مولکول‌های بزرگ، از جمله واکسن‌های زیرمجموعه‌ای بازتولیدی، نانوبدی‌ها/ VHHs/ آنتی‌بادی‌های تک‌دامنه‌ای (sdAbs)، قطعه‌های آنتی‌بادی، هورمون‌ها/پپتیدها، سیتوکاین‌ها، عوامل رشد (GF)، انزیم‌ها، کالاجن‌ها، و غیره، درگیر بوده‌ایم.
مقررات مربوط به پروفایل‌سازی N-گلیکان
بر اساس راهنمای ICH Q6B، «برای گلیکوپروتئین‌ها، محتوای کربوهیدرات (شکر‌های نوترال، شکر‌های آمینو و اسید سیالیک) تعیین می‌شود. علاوه بر این، ساختار زنجیره‌های کربوهیدرات، الگوی اولیگوساکارید (پروفایل آنتنی) و محل‌های گلیکوزیلاسیون زنجیر پلیپپتید تا حد ممکن تحلیل می‌شود.
روش تحلیلی
| تحلیل |
روش‌ها |
| بررسی N-گلیکان |
تحلیل کروماتوگرافی مایع-طیف‌سنجی جرمی (LC-MS) گلیکان‌های آزاد شده و نشانه‌گذاری شده |
رویه‌ها
۱. آزادسازی گلیکان با انزیم پپتید N-گلیکوزیداز F (PNGase F)
۲. مشتق‌گذاری گلیکان‌های آزاد شده با ۲-آمینوبنزامید (۲-AB)
۳. تصفیه N-گلیکان‌های حاصل در ستون TSK Amide - 80 اگر مقدار زیادی از دترجانت‌ها، نمک‌های غیرقابل تبخیر یا موادی با گروه‌های آمینو آزاد وجود داشته باشد
۴. نشانه‌گذاری با ۲-آمینوبنزامید (۲-AB) فلوئورسان
۵. تحلیل LC-MS گلیکان‌های نشانه‌گذاری شده
۶. تجزیه و تحلیل داده ها
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
